Если ифа положительный а пцр отрицательный гепатит с
Содержание статьи
Отрицательный результат анализа крови на гепатит С: значение и расшифровка
Гепатит С отрицательно — запись, которую ожидает увидеть каждый человек, сдающий анализ на наличие вируса. Но коварство вирусного гепатита в том, что у пациентов с сильным иммунитетом после заражения может пройти длительное время, прежде чем анализ покажет наличие инфекции и появятся симптомы. Поэтому после получения отрицательного результата нельзя быть уверенным в полном здоровье, особенно если человек находится в группе риска по заражению.
Какие бывают анализы на гепатит
Основные анализы крови — качественная и количественная ПЦР, выявляющие наличие частиц вирусов, их концентрацию и генотип. Данное исследование наиболее информативно для отслеживания стадии болезни и эффективности противовирусной терапии, что позволяет корректировать схему лечения.
Иммуноферментное исследование, или ИФА, показывает количество иммуноглобулинов IgM и IgG, вырабатывающихся в организме после инфицирования. Часто при отрицательной полимеразной цепной реакции на гепатит в крови обнаруживаются антитела, свидетельствующие о выздоровлении или переходе инфекции в хроническую (вялотекущую) форму.
Что значит отрицательный результат анализа на гепатит С
Иммуно-ферментный метод выявляет наличие иммуноглобулинов к вирусным частицам. По их виду и количеству можно определить давность заражения и стадию, на которой заболевание сейчас. Присутствие антител класса М свидетельствует о недавнем заражении и острой форме патологии. Через полгода после инфицирования и при переходе гепатита в хроническую форму обнаруживаются иммуноглобулины класса G.
Если иммунитет человека когда-либо контактировал с вирусом, результат будет положительным. Отрицательный ИФА на гепатит С регистрируется при отсутствии болезни и если иммунная система никогда не сталкивался с вирусом. Ложноотрицательный результат ИФА получают на ранних стадиях гепатита, пока иммуноглобулины не успели выработаться. Это период называют диагностическим (серологическим) окном и он длится не более 6 месяцев.
Исследование HCV RNA, или РНК вируса гепатита С, является высокоточным диагностическим методом. Полимеразная цепная реакция выявляет количество вирионов в 1 мл крови, а также их генотип. Эти данные очень важны, так как позволяют подобрать наиболее подходящие противовирусные препараты.
В расшифровке анализов крови на гепатит при отрицательном итоге будут указаны следующие данные: «не найдено» или «не обнаружено». Даже незначительное присутствие вирусных частиц — подтверждение заражения.
Отрицательный качественный ПЦР на гепатит С не всегда свидетельствует об отсутствии патологии. Иногда исследование показывает ложноотрицательный результат, если:
- анализ проводился в первые дни после заражения;
- были совершены ошибки при заборе и хранении биоматериала;
- пациент проходил длительное лечение уколами Гепарина.
Чтобы исключить инфекцию, проводится количественный подсчет вирусов в крови (вирусная нагрузка, или виремия).
Если анализ ПЦР на гепатит С отрицательный, то с вероятностью в 99% можно утверждать, что заболевание отсутствует. Человеку, не входящему в группу риска заражения, не стоит беспокоиться. Но если существует вероятность инфицирования, необходимо пройти более тщательное обследование через несколько недель.
Что делать с полученными данными
Отрицательный анализ на РНК вируса гепатита и вирусную нагрузку у человека, не имеющего симптомов поражения печени, не увлекающегося наркотическими веществами, не ведущего беспорядочной половой жизни, является нормой. Нет необходимости проводить повторное исследование.
Но если существует вероятность заражения, человек близко контактировал с носителем инфекции, присутствуют признаки заболевания или обнаружены антитела, требуется повторное обследование через две недели, месяц и через полгода.
Расшифровка анализов должна проводиться квалифицированным специалистом — гепатологом или инфекционистом. При этом важно учитывать референсные значения лаборатории, в которой проводилось исследование. Все диагностические центры используют различные реагенты, оборудование и анализаторы, что может сказаться на интерпретации результатов. Врач, расшифровывающий полученные данные, должен в первую очередь руководствоваться референсными значениями лаборатории, и только потом сравнивать их с общепринятыми стандартами.
Почему ИФА положительный, а ПЦР отрицательный
Человек начинает паниковать, если ПЦР отрицательный, но есть антитела к гепатиту С. Но выявление иммуноглобулинов в плазме крови не повод отчаиваться. Наличие антител часто показатель того, что иммунитет человека когда-либо сталкивался с вирусом, но смог его побороть, болезнь не развилась или прошла в легкой форме. Даже если инфекция не распространилась, вырабатывается иммунная память. Она проявляется в виде постоянной циркуляции в крови антител, защищающих организм от заражения той же инфекцией. Иммуноглобулины могут сохраняться до 8-10 лет после болезни.
У переболевшего человека при отрицательном ПЦР на гепатит С обнаруживают антитела класса G, свидетельствующие о ранее перенесенной инфекции. Они могут годами присутствовать в организме. Если после трех последовательных ПЦР-исследований РНК не были обнаружены, врачи делают запись: «здоров, постинфекционный иммунитет». После выздоровления важно обследоваться дважды в год, чтобы своевременно отследить, если болезнь снова начнет развиваться.
Если обнаружены антитела класса М, но ПЦР отрицательный, это может свидетельствовать о раннем этапе развития болезни (первые 4-6 недель) и низкой вирусной нагрузке. Чтобы подтвердить или опровергнуть диагноз, необходимо пройти повторное обследование. Если и вторая сдача анализа не выявила РНК вирусов, пациент считается здоровым.
Другие причины положительного ИФА при негативном ПЦР:
- Наличие аутоиммунных заболеваний.
- Присутствие других инфекций в организме.
- Недавно поставлена вакцина от гепатита Б, гриппа или столбняка.
- Наличие опухолевидных образований.
- Несоблюдение требований к взятию и транспортировке материала.
У беременных женщин часто регистрируются ложноположительные результаты из-за изменений гормонального фона, приводящими к модификации свойств крови и повышенному содержанию цитокинов.
Если у женщины во время беременности впервые обнаружены антитела, ей необходимо пройти всестороннее обследование. После рождения ребенка уровень иммуноглобулинов снижается или они полностью исчезают из крови женщины.
Источник
Что показывает анализ ИФА на вирус гепатита С, методы проведения и разновидности
Иммуноферментный анализ — это метод диагностики вирусных заболеваний. ИФА на гепатит С показывает реакцию иммунной системы на действие патогенных микроорганизмов. Для процедуры используют венозную кровь и ищут в ней антитела к вирусу гепатита. Иммуноферментный анализ недорогой, выполняется быстро, но требует подтверждения повторным ИФА или более дорогим ПЦР.
Сущность и достоверность метода
Метод основан на способности антител (клеток иммунной системы) образовывать комплексы с частицами вируса гепатита (антигенами). Для определения этих комплексов пользуются специальными маркерными ферментами. Анализ дает возможность выявить количество антител к вирусу в первые 6-12 недель болезни.
Подготовка к ИФА включает:
- исключение физических нагрузок за сутки до исследования;
- запрет на употребление алкогольных напитков, табачных изделий и жирной пищи;
- временное прекращение приема лекарственных препаратов и оральных контрацептивов.
Кровь для иммуноферментного анализа на гепатит берут утром натощак. Достоверность данного метода повышается при повторном проведении ИФА спустя 2 недели после процедуры.
Результат анализа показывает:
- уровень эффективности работы иммунной системы при борьбе с вирусом;
- стадию заболевания;
- течение — острый или хронический гепатит.
Женщинам в период беременности необходимо сдать кровь на ИФА минимум два раза:
- на ранних сроках (4-5 недель);
- перед родами;
Преимущества ИФА заключаются в:
- доступной стоимости анализа для всего населения;
- полной автоматизации процесса, исключающей ошибку человека;
- быстром получении результата анализа;
- возможности выявить инфекционное заболевание на ранних этапах;
- высокой точности.
Показания к ИФА на гепатит С
Гепатит С — опасное вирусное заболевание, которое передается через кровь и разрушает клетки печени.
Показания к анализу крови на ВГС:
- наличие ВИЧ-инфекции;
- симптомы острого гепатита: рвота, вялость, чувство горечи во рту, отсутствие аппетита, желтушный цвет кожных покровов и др.;
- хронический гепатит;
- наличие в биохимическом анализе крови повышенного билирубина и изменение коэффициента де Ритиса (указывают на нарушения работы печени);
- принадлежность к группе риска (врачи, медсестры, наркозависимые);
- наркотическая и алкогольная зависимость.
Проверку на гепатит С обязаны проходить военные, сотрудники правоохранительных органов, работники общепита и социальных служб.
Какие антитела обнаруживает тест
Анализ на гепатит С, проведенный методом ИФА, способен обнаружить антитела двух типов:
- IgM;
- IgG.
IgM — иммуноглобулин, имеющий самую крупную молекулярную массу и неспособный проникать через плацентарный барьер. Антитела класса IgM вырабатываются в организме первыми — спустя 6 недель после заражения. Через полгода уровень иммуноглобулинов типа М снижается и остается таким до следующего рецидива болезни (при хроническом гепатите). Иммуноглобулины M являются основой первичного иммунного ответа зараженного организма.
IgG — основной иммуноглобулин сыворотки крови, является вторичным иммунным ответом. Обеспечивает иммунитет ребенка, рожденного от инфицированной матери. Иммуноглобулины G вырабатываются спустя 3 месяца после возникновения заболевания, достигают максимальной концентрации на пятом месяце и остаются в этом количестве на протяжении многих лет.
В периоде острого вирусного гепатита есть две стадии. На первой происходит активация и выделение IgM, на второй — IgG. В острой фазе болезни IgM и IgG образуются к нуклеокапсидному белку вируса Core. При латентном (скрытом) течении вырабатываются IgG к белку core и неструктурному белку NS.
Способы проведения
Диагностика гепатита включает два способа проведения ИФА — прямой и непрямой.
Прямой
Прямой метод ИФА на антитела к гепатиту С основан на образовании комплексов антиген-антитело.
Стадии проведения:
- В специальную таблицу с лунками заносят биологический материал пациента (кровь) и оставляют на 30 минут. Важные элементы приклеиваются ко дну лунок.
- Добавляют специальные меченые антитела. Они прикрепляются к антителам исследуемой крови (если такие есть). Здесь выжидают несколько часов.
- Содержимое лунок сливают и промывают от лишних веществ.
- В каждую лунку добавляют ферменты, которые распознают добавленные ранее антитела. Ферменты связаны со специальным маркером.
- При положительной реакции маркерное вещество становится окрашенным.
Эта методика включает несколько простых шагов и обеспечивает достоверный результат.
Непрямой
Непрямой метод ИФА отличается тем, что в системе участвуют не два, а три компонента.
Он включает два варианта:
- Конкурирующий: в исследуемую систему добавляют антигены, кровь пациента, в которой предполагается наличие иммуноглобулинов, и антитела, помеченные ферментом. Две группы антител вступают в борьбу за образование комплексов с антигеном. Положительной реакция считается при максимальном количестве антител первой группы и минимальном — второй группы.
- Сэндвич-ИФА: в лунки заносят антитела к исследуемому антигену, после чего добавляют кровь и новые антитела. Исследуемый антиген оказывается между двумя молекулами иммуноглобулинов. Этот «сэндвич» виден визуально или при подсвечивании специальным спектром.
Расшифровка анализа
Существует четыре варианта расшифровки анализа:
- Положительный результат. В исследуемом материале обнаружены IgM и IgG к вирусу гепатита — означает, что человек заражен давно (более 3 месяцев назад). Если обнаружены только IgM, то инфекция попала в кровь месяц назад, если только IgG — произошло выздоровление или хронизация гепатита.
- Отрицательный результат. Иммуноглобулинов в исследуемой крови не обнаружено. Человек полностью здоров.
- Ложноположительный результат. ИФА всегда нужно проверять полимеразной цепной реакцией (выявляет сам вирус в крови или печеночной ткани). Если ПЦР дает отрицательный результат, то ИФА следует провести заново.
- Сомнительный результат. Если прошло очень мало времени после рискованной ситуации, ИФА может не выявить наличия антител. Для подтверждения результата необходимо провести повторный анализ через две недели.
Ложноположительный и ложноотрицательный результаты ИФА могут возникнуть вследствие ошибки в лаборатории или неправильной подготовке к анализу. У беременных ложные результаты встречаются чаще, чем у остальных людей.
Почему ИФА положительный, а ПЦР отрицательная
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — дополнительный метод диагностики вирусных заболеваний. Выявляет РНК вируса, то есть его генетическую информацию, применяется для подтверждения диагноза. В некоторых случаях ПЦР дает отрицательный результат при положительном показателе ИФА.
Почему так происходит:
- Выздоровление: ПЦР реагирует только на РНК вируса гепатита, а ИФА может дать положительный результат и после выздоровления, ведь он выявляет клетки иммунной системы, которые сохраняются в крови на несколько лет.
- Разный исследуемый материал: при заборе из разной локализации может возникнуть несоответствие результатов. Так, для ПЦР берут не только кровь, но и кусочек ткани печени.
- Разные тестовые системы.
Что покажет ИФА после лечения гепатита
После пройденной терапии против гепатита С необходимо еще раз сдать кровь на ИФА.
Иммуноглобулины G сохраняются в организме несколько лет после выздоровления, поэтому повторный анализ на гепатит может быть положительным. В этом случае необходимо дополнительно сдать кровь на ПЦР. Отрицательный результат ПЦР на гепатит будет свидетельством того, что человек здоров, а положительный — подтвердит ИФА и укажет на некачественное лечение.
Отрицательный результат повторного ИФА является подтверждением выздоровления.
ИФА относится к лабораторным методам высокой точности и позволяет выявить заболевание на ранних сроках. При первых симптомах гепатита нужно срочно обратиться к врачу, который назначит необходимые анализы для подтверждения диагноза.
Если у вас так же обнаружен РНК гепатита С в крови (вирусная нагрузка), рекомендуем ознакомиться с материалом по расшифровке анализов при гепатите С.
Источник
Исследования на вирус гепатита С
Антитела к вирусу гепатита С ( суммарные)
Антитела к вирусу гепатита С в сыворотке в норме отсутствуют
Суммарные антитела к вирусу гепатита С представляют собой антитела классов IgM и IgG, направленные к комплексу структурных и неструктурных белков вируса гепатита С.
Это исследование является скрининговым для выявления пациентов с ВСГ. Суммарные антитела к вирусу гепатита С можно выявить в первые 2 недели заболевания, и их присутствие свидетельствует о возможной инфицированности вирусом или перенесенной инфекции.
Однозначный ответ на основании результатов данного теста получить невозможно, так как тест определяет суммарные антитела IgM и IgG. Если это ранний период острого вирусного гепатита С, то об этом свидетельствуют антитела IgM, а если это период реконвалесценции или состояние после перенесенного ВГС, то на это указывают антитела IgG.
Антитела IgG к ВГС могут сохраняться в крови реконвалесцентов на протяжении 8-10 лет с постепенным снижением их концентрации. Возможно позднее обнаружение антител спустя год и более после инфицирования. При хроническом гепатите С суммарные антитела определяются постоянно. Поэтому для уточнения сроков инфицирования необходимо отдельно определить антитела класса IgM к ВГС.
Оценка результатов исследования
Результат исследования выражается качественно — положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие суммарных антител (JgM и JgG) к ВГС в сыворотке крови. Положительный результат — выявление суммарных антител (JgM и JgG) к ВГС свидетельствует о начальной стадии острого вирусного гепатита С, остром периоде инфекции, ранней стадии реконвалесценции, перенесенном вирусном гепатите С или хроническом вирусном гепатите С.
Однако обнаружение суммарных антител к ВГС недостаточно для постановки диагноза ВГС и требует подтверждения для исключения ложноположительного результата исследования. Поэтому при получении положительного результата скринингового исследования на суммарные антитела к ВГС в лаборатории проводится подтверждающий тест. Окончательный результат определения суммарных антител к ВГС выдается совместно с результатом подтверждающего теста.
Антитела к вирусу гепатита С JgM
Антитела к вирусу гепатита С JgM в сыворотке в норме отсутствуют. Наличие антител класса JgM к ВГС в крови пациента позволяет верифицировать активную инфекцию. Антитела класса JgM могут выявляться не только при остром ВГС, но и при хроническом гепатите С.
Антитела класса JgM к ВГС появляются в крови пациента спустя 2 недели после развития клинической картины острого вирусного гепатита С или обострения хронического гепатита и обычно исчезают спустя 4-6 месяцев. Снижение их уровня может свидетельствовать об эффективности лекарственной терапии.
Оценка результатов исследования
Результат исследования выражается качественно — положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие антител JgM к ВГС в сыворотке крови. Положительный результат — выявление антител JgM к ВГС свидетельствует о начальной стадии острого вирусного гепатита С, остром периоде инфекции, ранней стадии реконвалесценции или активном хроническом вирусном гепатите С.
Обнаружение вируса гепатита С методом ПЦР (качественно)
Вирус гепатита С в крови в норме отсутствует.
В отличие от серологических методов диагностики ВГС, где обнаруживают антитела к ВГС, ПЦР позволяет выявить наличие непосредственно РНК ВГС в крови как качественно, так и количественно. Определяемым фрагментом в обоих служит консервативный участок генома гепатита С.
Обнаружение только антител к ВГС подтверждает лишь факт инфицирования пациента, но не позволяет судить об активности инфекционного процесса (о репликации вируса), о прогнозе заболевания. Кроме того, антитела к вирусу ГС обнаруживают как в крови больных острым и хроническим гепатитом,так и у тех пациентов, кто болел и выздоровел, а нередко антитела в крови появляются только спустя несколько месяцев после появления клинической картины заболевания, что затрудняет диагностику. Обнаружение вируса в крови методом ПЦР — более информативный метод диагностики.
Качественное выявление ВГС методом ПЦР в крови свидетельствует о виремии, позволяет судить о размножении вируса в организме и является одним из критериев эффективности противовирусной терапии.
Аналитическая чувствительность метода ПЦР составляет не менее 50-100 вирусных частиц в 5 мкл, прошедшей выделение ДНК-пробы, специфичность — 98%. Обнаружение РНК вируса гепатита С с помощью ПЦР на ранних этапах развития вирусной инфекции (возможно уже через 1-2 недели после заражения) на фоне полного отсутствия каких-либо серологических маркеров может служить самым ранним свидетельством инфицирования.
Однако изолированное выявление РНК вируса гепатита С на фоне полного отсутствия каких-либо других серологических маркеров не может полностью исключить ложноположительный результат ПЦР. В таких случаях требуется всесторонняя оценка клинических, биохимических и морфологических исследований и повторное неоднократное подтверждение наличия инфекции ПЦР.
Согласно рекомендациям ВОЗ для подтверждения диагноза вирусного гепатита С необходимо троекратное выявление РНК вируса гепатита С в крови пациента.
Обнаружение РНК вируса гепатита С методом ПЦР используется в целях:
- разрешения сомнительных результатов серологических исследований;
- дифференциация гепатита С от других форм гепатита;
- выявление острой стадии заболевания по сравнению с перенесенной инфекцией или контактом; определения стадии инфицированности новорожденных от серопозитивных по вирусу гепатита С матерей;
- контроля эффективности противовирусного лечения.
Обнаружение вируса гепатита С методом ПЦР (количественно)
Количественный метод определения содержания РНК вируса гепатита С в крови дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к антивирусным препаратам. Аналитическая чувствительность метода составляет от 5.102 копий/мл вирусных частиц в сыворотке крови, специфичность — 98%.
Уровень виремии оценивают следующим образом: при содержании РНК ВГС от 10^2 до 10^4 копий/мл — низкий; от 10^5 до 10^7 копий/мл — средний и выше 10^8 копий /мл — высокий.
Количественное определение содержания РНК ВГС в сыворотке крови методом ПЦР имеет важное значение для прогноза эффективности лечения интерфероном-альфа. Показано, что наиболее благоприятный прогноз заболевания и наибольшую вероятность положительного ответа на противовирусную терапию имеют лица с низким уровнем виремии. При эффективном лечении уровень виремии снижается.
Генотипирование вируса гепатита С — определение генотипа
Метод ПЦР позволяет не только выявить РНК ВГС в крови, но и установить его генотип. Наиболее важное значение для клинической практики имеют 5 субтипов ВГС — 1а, 1b, 2а, 2b и 3а. В нашей стране наиболее часто встречается субтип 1b, далее идут 3а, 1а, 2а.
Определение генотипа (субтипа) вируса имеет важное значение для прогноза течения ВГС и подбора пациентов с хроническим ВГС к проведению лечения интерфероном-альфа и рибавирином.
При инфицировании пациента субтипом 1b хронический ВГС развивается примерно в 90% случаев, при наличии субтипов 2а и 3а — в 33-50%. У пациентов с субтипом 1b заболевание протекает в более тяжелой форме и часто заканчивается развитием цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы. При инфицировании субтипом 3а у больных более выражен стеатоз, поражение желчевыводящих путей, активность АЛТ и менее выражены фиброзные изменения в печени, чем у пациентов с субтипом 1b.
Показаниями к лечению хронического ВГС интерфероном-альфа являются:
- повышение уровня трансаминаз;
- наличие РНК ВГС в крови;
- генотип 1 ВГС;
- высокий уровень виремии в крови;
- гистологические изменения в печени: фиброз, умеренные или выраженные воспалительные явления.
При лечении интерфероном-альфа больных вирусным гепатитом С с субтипом 1b эффективность терапии отмечается в среднем в 18% случаев, у инфицированных другими субтипами — в 55%. Использование комбинированной схемы лечения (интерферон-альфа + рибавирин) повышает эффективность терапии. Стойкий ответ наблюдается у 28% больных с субтипом 1b и у 66% — с другими субтипами ВГС.
Источник