Гепатит с положительный пцр
Содержание статьи
Как с помощью ПЦР определяют вирусный гепатит С: виды анализов и расшифровка
ПЦР-диагностика гепатита С – это исследование биологических образцов с применением полимеразной цепной реакции. Способ заключается в многократном копировании фрагментов РНК вируса. Благодаря такой методике всего нескольких молекул возбудителя достаточно для того, чтобы тест отреагировал на присутствие вируса. Результат можно получить уже в первые 5-7 дней после контакта с зараженным человеком. ПЦР позволяет выявить факт инфицирования, а также приблизительную концентрацию HCV и его генотип.
Когда назначается анализ ПЦР
Самая очевидная причина для назначения ПЦР на гепатит С в крови – это наличие признаков заболеваний печени:
- хроническая усталость;
- боли в области печени;
- желтизна кожи и белков глаз;
- гипертрофия печени;
- тошнота.
Анализ на ПЦР целесообразно сделать в условиях повышенного риска заражения:
- сексуальный контакт с предполагаемым носителем гепатита;
- повышенная активность АЛТ и АСТ, выявленные по результатам биохимического анализа крови;
- если результат ИФА на антитела к вирусу гепатита положительный.
Другие показания к сдаче крови:
- Врачи-гепатологи назначают ПЦР на гепатит С в профилактических целях перед операциями.
- Медработники и сотрудники детских садов и школ сдают анализ в ходе плановых проверок.
- Метод показан при проведении вакцинации против вируса гепатита В.
- Анализ проводится несколько раз в ходе терапии гепатита С, чтобы оценить ее эффективность.
- ПЦР нужен для исключения смешанного поражения печени, что иногда бывает при гепатите В.
Как подготовиться и сдавать кровь
В течение дня у человека меняется соотношение эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, а также активность некоторых гормонов. Прием пищи влияет на наличие жирных кислот в крови. Этот фактор мешает точности анализа. По этим причинам анализ ПЦР на гепатит С проводится утром натощак. В качестве исследуемого образца берется кровь из вены.
Перед сдачей анализа требуется подготовка:
- за 2-3 дня – ограничить нагрузку на печень (исключить алкогольные напитки, не употреблять жирную и жареную пищу);
- за сутки – исключить стресс, поднятие тяжестей, посещение спортзала и бассейна;
- за 8 часов – прекратить употребление любой пищи, так как глюкоза, жиры, минералы, попадающие в кровь, изменяют качество ферментной реакции;
- с утра до момента сдачи крови – не курить.
На результат анализа может повлиять повышение концентрации адреналина в крови. Чтобы исключить эту погрешность, нужно прийти на 20 минут раньше, отдышаться и успокоиться.
На эффективность анализа крови могут влиять разные препараты – БАДы, средства с кофеином, этанолом, глюкозой, леводопой, пероральные контрацептивы, антибиотики. Даже если человек принимает обычные витамины, об этом нужно предупредить врача.
Расшифровка ПЦР на гепатит С
В настоящее время используются три метода ПЦР:
- качественный (тест на наличие или отсутствие вируса);
- количественный (тест на концентрацию вируса в крови);
- с генотипированием (определяет принадлежность HVC к конкретному генотипу и субтипу).
Качественный анализ
Качественный анализ – это метод диагностики гепатита С, который позволяет подтвердить или опровергнуть присутствие вируса в крови. Выявляет наличие в определенной концентрации – в пределах 10-500 МЕ/мл. Выполняется в течение 1-4 дней и дает следующие результаты:
- «Не обнаружено» – вирус отсутствует либо его концентрация так мала, что реагент его не распознает.
- «Обнаружено» – вирус HCV присутствует, и его концентрация выше минимального порога чувствительности. Анализ выдает такой результат уже на 3-4 день после заражения.
Количественный анализ
Этот метод оценивает вирусную нагрузку, которая меняется в зависимости от стадии заболевания или этапа излечения. Метод не только показывает наличие флавивируса, но и его концентрацию в МЕ (международных единицах) на 1 мл крови. Это играет решающую роль при выборе тактики лечения гепатита С. Результаты количественной ПЦР-диагностики записываются следующим образом:
Количество вируса (МЕ/мл) | Расшифровка |
Нет | Вирус отсутствует или количество HCV недостаточно для того, чтобы тест на него среагировал. |
Менее 1,8х10^2 | Концентрация вируса ниже линии границы. |
Менее 8х10^5 | Количество незначительное, соответствует началу заболевания. Прогноз благоприятный. |
Более 8х10^5 | Количество высокое, требуется лечение. |
Более 2.4х10^7 | Концентрация вируса выше линейного диапазона. |
В результатах анализов очень часто можно увидеть степени, которые обозначаются как «^», например, 6*10^5 МЕ/МЛ, 10 в пятой степени это 100 тысяч, соответственно 6*10^5 МЕ/МЛ = 600 000 МЕ/МЛ.
Для упрощения подсчетов:
10^2 = 100
10^3 = 1000
10^4 = 10 000
10^5 = 100 000
10^6 = 1 000 000
Просто подставляйте результат вашего анализы, который стоит перед знаком умножить, и вы получите результат. Учтите, что единицы измерения могут отличаться (копий/мл, ме/мл).
Если затрудняетесь или есть вопросы по другим переменным анализов, вы всегда можете написать нашему дежурному врачу-инфекционисту (чат в правом нижнем углу экрана). Он бесплатно расшифрует ваши анализы.
Количественный анализ ПЦР на гепатит С необходим для оптимального выбора препарата. С его помощью можно прогнозировать осложнения и эффективность терапии. Он позволяет оценить степень заразности носителя гепатита для окружающих: чем большее число вирусов насчитывается в крови, тем больше риск заражения.
Генотипирование
Сегодня известно, что у гепатита С имеется 11 генотипов и огромное количество субтипов. В разных странах есть свои приоритетные разновидности. В России в основном встречается 1 генотип (1b чаще, чем 1а), на втором месте по распространенности – 3 генотип (субтип 3а), на третьем – 2.
У каждого генотипа свои особенности. Зная их, можно спрогнозировать характер течения инфекции, риск перехода в хроническую форму и вероятность ответа на противовирусную терапию. Например, 3 генотип HCV провоцирует стеатоз, а 1 генотип требует лечения в течение 48 недель. По рекомендациям Минздрава генотипирование должно предшествовать противовирусной терапии.
Исходя из результатов, врач определяет противовирусный препарат, его дозировку, курс приема.
Преимущества и недостатки ПЦР
ПЦР-диагностика на вирусный гепатит С опережает иные методы по чувствительности, низкой вероятности ошибок и другим показателям:
- Позволяет выявить вирус на самых ранних стадиях, когда концентрация его в крови ничтожно мала. Для сравнения, иммунофлюоресцентный анализ (ИФА) реагирует только на иммуноглобулины, а они вырабатываются лишь через несколько недель в ответ на инфекцию. В то же время ПЦР реагирует на сам антиген и показывает присутствие вируса уже через 5 дней после заражения.
- Ложные результаты возникают гораздо реже, чем у других методов. Так, у ИФА возможны ложные результаты на гепатит при появлении перекрестных антител, но ПЦР реагирует непосредственно на патогены и такой погрешности не имеет.
- ПЦР – высокочувствительный метод. Анализ реагирует на присутствие РНК вируса гепатита уже 10-100 клеток в пробе и дает результат еще задолго до появления первых симптомов.
- В отличие от культуральных методов исследования, ПЦР проводится методом высокотехнологичной автоматизированной амплификации, что позволяет проводить тестирование в день забора.
Тест универсален и позволяет обнаружить несколько типов возбудителей гепатита в одной биологической пробе.
ПЦР-диагностика гепатита имеет и свои недостатки. Главный из них связан со способностью микроорганизмов к мутации. Вирусы гепатита приспосабливаются к условиям окружающей среды, и их генотип меняется. Когда это происходит, диагностическая система не может уловить гибрид. Второй недостаток ПЦР связан с возможностью получения ложноположительного и ложноотрицательного результата. Чтобы избежать ошибки, нужно соблюдать правила забора материала. Чаще всего погрешности возможны после уже проведенного лечения, поэтому принимать решение об отмене терапии может только лечащий врач.
Источник
Положительный результат на гепатит C: может быть, это ошибка?
23 ноября 2016 г.
Просмотров: 17107
В медицине есть такое понятие — «ложноположительный результат». Его получают, когда анализы показывают, что пациент болен, а на самом деле никакой болезни нет. Случается это редко, но никому не хочется попасть в тот самый небольшой процент, особенно когда речь идет о таком серьезном заболевании, как гепатит C.
В каких случаях возможны ошибки, и почему они происходят? Для начала разберемся, как диагностируют вирусный гепатит C.
Что такое скрининг на гепатит C, и как проверяют его результаты?
Существует семь типов вирусов, способных вызывать инфекционный гепатит. Проблема в том, что установить правильный диагноз на основании симптомов невозможно. Для того чтобы точно сказать, какой вирус вызвал воспаление в печени, врач должен назначить лабораторные исследования.
Для выявления вирусного гепатита C используют два вида анализов крови:
- Выявление антител, которые собственная иммунная система человека вырабатывает в ответ на вирус (Anti-HCV), как правило, при помощи иммуноферментного анализа.
- Обнаружение РНК вируса при помощи полимеразной цепной реакции (ПЦР).
ПЦР — метод довольно дорогой, назначать его всем подряд нецелесообразно. В качестве скринингового теста назначают анализ на антитела Anti-HCV. Он более дешевый и доступный, но дает ложноположительный результат в 10–15% случаев. Поэтому положительный результат такого анализа всегда нужно подтверждать при помощи ПЦР-теста на РНК.
Почему же может «соврать» анализ на антитела? Возможных причин несколько.
Был болен, но выздоровел
Вирус гепатита C способен вызывать тяжелую болезнь не у всех людей. Примерно в 25% случаев организм инфицированного человека избавляется от возбудителя самостоятельно. В итоге вируса уже нет, а антитела против него — есть. Анализ выявляет их, а во время последующего ПЦР-теста результат оказывается отрицательным.
Такие люди здоровы, риск того, что они кого-нибудь заразят, практически равен нулю, у них не повышен риск цирроза и рака печени, как у «настоящих» больных гепатитом C. Тем не менее, в данном случае результат анализа нельзя назвать ложноположительным. Ошибки не было. Вирус в организме побывать успел, антитела в ответ на него выработались.
Ложноположительные результаты на гепатит C
О ложноположительном результате можно говорить, когда человек не был инфицирован вирусом гепатита C, возбудитель никогда не был в его организме, но анализ на антитела Anti-HCV показывает положительный результат.
Происходит это чаще всего из-за того, что во время анализа в качестве «противогепатитных» ошибочно распознаются другие антитела, которые организм выработал в ответ на другую инфекцию или в ходе аутоиммунной реакции.
Ложноположительный результат на гепатит C возможен у людей, больных ОРЗ, ретровирусной инфекцией, малярией, герпесом, туберкулезом, склеродермией, рассеянным склерозом и некоторыми другими заболеваниями, перенесших вакцинацию от гепатита B, столбняка, гриппа.
Всем будущим мамам в самом начале беременности назначают скрининговый анализ на гепатит C, и он также может показать ложноположительный результат. Это случается из-за изменений, которые происходят в организме некоторых беременных женщин.
Иногда ложноположительные результаты могут быть связаны с ошибкой лаборатории.
Прояснить ситуацию поможет тест на РНК вируса, который либо подтвердит, либо опровергнет диагноз. С большей вероятностью — подтвердит, потому что ложноположительные результаты при анализе крови на антитела, хотя и встречаются, но не очень часто.
Бывают ли ложноотрицательные результаты?
В редких случаях анализ на антитела показывает отрицательный результат, хотя на самом деле человек уже инфицирован. Происходит это, как правило, в «период окна», когда вирус уже проник в организм, но иммунная система на него среагировать не успела, антитела пока еще не выработались. При гепатите C этот промежуток времени обычно составляет 4–6 недель.
Антитела не выявляются у людей с сильно ослабленной иммунной системой, например, у больных ВИЧ.
Ложноотрицательные результаты опаснее ложноположительных. При положительном результате теста на Anti-HCV перепроверку при помощи ПЦР производят всегда, а при отрицательном, скорее всего, её никто проводить не станет. Если результат был ложноотрицательным, и человек на самом деле болен, высока вероятность, что он снова попадет к врачу и сдаст анализы, лишь когда появятся выраженные симптомы. Лечение будет начато с опозданием.
В большинстве случаев (85–90%) правильный, достоверный результат удается получить на этапе скрининга. Гепатит C — серьезное заболевание, его не случайно называют «ласковым убийцей». Со временем он может привести к циррозу и раку печени. Если вы входите в группу повышенного риска — сдайте анализ, проверьтесь.
Источник
Анализ ПЦР на гепатит C
По оценкам, около 3% населения мира инфицировано вирусом гепатита С или гепатотропным РНК-вирусом, передаваемым через кровь. Основные способы передачи вируса включают инъекционное употребление наркотиков, небезопасные методы инъекций, переливание крови и т. д. Вирус вызывает хронический гепатит примерно у 80% инфицированных. Проведено множество исследований людей с подозрениями на гепатит. Антигены вируса гепатита С были обнаружены в цереброспинальной жидкости у 8 из 13 пациентов с ВГС. Когда медики копнули глубже, оказалось, что Вирус гепатита С может переноситься в мозг.
Вирус гепатита С – это гепатотропный вирус, который является одной из основных причин заболевания печени и потенциальной причиной значительной заболеваемости и смертности во всем мире. Вирус вызывает острый гепатит, который в основном субклинический, но постепенно развивается в хронический гепатит примерно у 80% инфицированных. Люди, инфицированные ВГС, подвержены риску развития хронического заболевания печени, цирроза и первичной гепатоцеллюлярной карциномы.
Медики рекомендует скрининг всех лиц с факторами риска инфицирования ВГС на антитела к ВГС (против ВГС) или в определенных ситуациях с помощью полимеразной цепной реакции. Если пройти своевременное обследование и сдать анализ ПЦР на гепатит С, можно узнать, есть ли заболевание.
Что представляет ПЦР на гепатит
ПЦР – это метод полимеразной цепной реакции, который проводят для обнаружения возбудителя. Диагностические тесты на гепатит С можно разделить на следующие общие категории: серологические анализы, которые обнаруживают антитела к вирусу гепатита С; молекулярные анализы, которые обнаруживают и количественно определяют или характеризуют геномы вируса у инфицированного пациента.
Серологические анализы были разделены на скрининговые тесты на анти-ВГС (иммуноферментный анализ) и дополнительные тесты, такие как анализ рекомбинантного иммуноблотинга. Были разработаны три поколения тестов ПЦР, и каждое из них привело к улучшению чувствительности обнаружения анти-ВГС.
Чаще всего проводится анализ крови. Это помогает обнаружить наличие антител в крови. Если есть хотя бы малейшее количество антител – пациент является носителем вируса гепатита, так как у здоровых неинфицированных людей этот показатель равен нулю.
Как проводится процедура
Процедура проводится путем сбора крови в лаборатории. Подготовка к анализу не сложная. Кровь следует собрать натощак с самого утра. Необходимо соблюдать все стерильные условия, так как бывают случаи, когда вирус заносят при несоблюдении санитарных условий или при повторном использовании перчаток.
Далее анализы направляются на тестирование. Спустя 1-2 суток анализ будет готов. В некоторых случаях берут дополнительный образец крови, через несколько дней, чтобы точно подтвердить наличие или отсутствие РНК.
Молекулярные вирусологические методы играют ключевую роль в диагностике и мониторинге лечения ВГС. Поскольку выращивание вируса в клетке трудно, молекулярные методы помогли выявить вирус, сделав его одним из первых патогенов, идентифицируемых чисто молекулярными методами.
Метод NAT (международный стандартный метод) считается «золотым стандартом» для обнаружения активной репликации ВГС. Он чрезвычайно эффективен для установления диагноза острой инфекции, поскольку РНК обнаруживается уже через 1 неделю после возможного инфицирования, и по меньшей мере, за 4-6 недель до сероконверсии. Диагноз инфекции устанавливается с помощью скрининга антител, за которым следует NAT для РНК ВГС для подтверждения, а также для наблюдения за пациентами во время лечения. Оценка вирусной нагрузки на исходном уровне также имеет решающее значение для определения ответа вируса во время терапии.
Когда необходимо сдать ПЦР на гепатит
ПЦР проводят при обнаружении антител к вирусу гепатита или подозрении на гепатит С. Иногда бывает и так, что человек уже является носителем гепатита или даже имеет активную форму этой болезни. Пациенты с хроническим гепатитом С, вероятно, будут иметь значительные изменения в своем физическом и психическом состоянии, чаще всего проявляющиеся как усталость и депрессия, а сам вирус гепатита С может влиять на мозговую функцию. Существует вероятность прямого инфицирования центральной нервной системы.
Есть несколько вариантов, как передается вирус, поэтому необходимо их знать. Если у пациента в жизни были подобные ситуации, стоит проверится на ВГС методом ПЦР.
Вирус передается от одного человека другому, главным образом парентеральным путем. Основными путями передачи являются:
- потребление инъекционных наркотиков, использование нестерильных шприцев;
- переливание крови и инъекции;
- связанные с здравоохранением процедуры (профессиональные воздействия, такие как операции, зондирование, некоторые виды обследований);
- татуаж;
- распространение инфекции половым путем.
Передача профессиональным, перинатальным и половым путем менее активны по сравнению с передачей через кровь. Следовательно, эти способы не считаются основными источниками новой инфекции ВГС, независимо от населения или географического района.
Скрининг инфекции имеет несколько потенциальных преимуществ. При раннем выявлении инфекции антивирусное лечение может быть предложено в ходе заболевания, которое более эффективно на ранней, чем на поздней стадии.
Кроме того, скорейшее выявление вместе с рекомендациями и модификациями образа жизни может снизить риск передачи инфекции другим людям. Оптимальным подходом к скринингу является проверка лиц, имеющих факторы риска. Самым частым случаем, когда передается вирус, является переливание крови.
Риск инфицирования у реципиентов переливания крови слишком высок. До начала 21 века переливание крови приводило к высокому риску заражения, приблизительно 15-20%. В 20 веке 90% случаев посттрансфузионного гепатита были вызваны теми же вирусами.
Переход на взятие крови у добровольцев вместо платных доноров значительно снизил риск развития посттрансфузионного гепатита (до 10%). Скрининг крови дополнительно уменьшал возможность посттрансфузионного гепатита С, примерно в 10 000 раз – к нынешней ставке 1 на миллион переливаний. Несколько случаев, которые все еще происходят, связаны с тем, что недавно инфицированные люди сдавали кровь прежде, чем они вырабатывали антитела (период окна) к вирусу, что может занять до 6-8 недель.
Эффективность процедуры
Обнаружение вируса у пациентов во время полимеразной цепной реакции (ПЦР) свидетельствует о наличии активной инфекции и потенциально полезно для подтверждения диагноза и мониторинга антивирусного ответа на терапию.
Оптимальные анализы ПЦР в настоящее время имеют чувствительность менее 100 копий РНК ВГС на миллилитр плазмы или сыворотки. Стандартизация и проверка качества диагностических лабораторий, выполняющих ПЦР ВГС, остается важной проблемой для будущего исследования.
Существуют две основные технологии для оценки уровней РНК ВГС или вирусной нагрузки. Количественная ПЦР является наиболее чувствительным критерием для определения вирусной нагрузки на гепатит С, тогда как тест ДНК с разветвленной цепью представляется наиболее точным методом.
Основными ограничениями текущих тестов являются неадекватный динамический диапазон, высокая вариабельность анализов на основе ПЦР и низкая чувствительность теста ДНК с разветвленной цепью. Молекулярные тесты также разработаны для классификации ВГС на отдельные генотипы.
Проблема профессионального донорства крови и небезопасных методов инъекций является потенциальным источником заражения гепатитом С во всем мире. Все практикующие врачи должны понимать, как установить или исключить диагноз инфекции ВГС и правильно интерпретировать тесты.
В отсутствие профилактической или терапевтической вакцины, а также постконтактной профилактики против вируса, необходимо диагностировать инфекцию ВГС, чтобы предотвратить заражение и последующие осложнения, включая первичную гепатоцеллюлярную карциному.
Тем не менее очень многое зависит от самого пациента. Если человек замечает у себя хотя бы некоторые подозрения на инфицирование или ощущает определенные симптомы (хроническая усталость, сонливость, потеря сил) – необходимо обратиться к лечащему врачу за направлением на анализ ПЦР на гепатит С.
Источники
- Малыш П. Н. Полимеразная цепная реакция в диагностике гемотрансмиссивных инфекций – Луганск, Украина, 2009
Больше свежей и актуальной информации о здоровье на нашем канале в Telegram. Подписывайтесь: https://t.me/foodandhealthru
Автор статьи:
Извозчикова Нина Владиславовна
Специальность: инфекционист, гастроэнтеролог, пульмонолог.
Общий стаж: 35 лет.
Образование: 1975-1982, 1ММИ, сан-гиг, высшая квалификация, врач-инфекционист.
Ученая степень: врач высшей категории, кандидат медицинских наук.
Повышение квалификации:
- Инфекционные болезни.
- Паразитарные заболевания.
- Неотложные состояния.
- ВИЧ.
Источник