Норма пцр при гепатите в что это такое

Анализ ПЦР на гепатит B

ДНК-содержащий вирус семейства Hepadnaviridae является прямым возбудителем гепатита В. Анализ ПЦР на гепатит B, позволяет определить в крови пациента наличие ДНК-вируса. Положительный  результат на ДНК HBV демонстрирует наличие в крови пациента инфекции. Стоит отметить, что диагностика посредством использования ПЦР-анализа позволяет не только определить наличие инфекции, но и его количественную нагрузку и активность. Этот метод является надежным, точным и воспроизводимым. Количественная оценка ДНК HBV с помощью qPCR может использоваться для контроля эффективности терапии HBV и быть полезной для понимания естественной истории HBV.

Процесс заражения гепатитом В происходит бытовым или половым путем, либо через непосредственный контакт с зараженной кровью. После инфицирования, вирус попадает в клетки печени, в которых и продолжает свое активное размножение. Через кровоток патогенные клетки распространяются по всему организму. Стоит отметить, что вирус гепатита В обладает высокой устойчивостью к воздействию кислоты и высокой температуры. Он способен в течение полугода сохранять свои поражающие свойства.

Виды ПЦР на гепатит В

На сегодняшний день различают две разновидности диагностики, которые назначают при подозрении на наличие вируса гепатита В: качественный ПЦР (позволяет определить со стопроцентной точностью наличие вируса в крови) и количественный ПЦР (позволяет определить степень активности вируса).

Качественный ПЦР назначается в том случае, если есть подозрение на заражение ВГВ, или в случае, если иные методы диагностики не дали внятного результата. Данную разновидность ПЦР-анализа расшифровывать предельно просто: отрицательный (вирус в крови не обнаружен), положительный (вирус в крови обнаружен). Основная задача качественного анализа – определение наличия инфицированных клеток на ранних стадиях заболевания. Если вирус был диагностирован через две недели после предположительного инфицирования, эффективность лечения будет на порядок выше. В случае, если вирус в крови находится порядка двух месяцев, заболевание приобретает хроническую форму, следовательно, не подлежит полному излечению.

Если качественная диагностика подтвердила присутствие в крови ВГВ, доктор назначает количественный анализ.

Количественный анализ позволяет определить активность развития вируса в организме пациента. Данная разновидность ПЦР-анализа назначается:

  • для определения стадии заболевания;
  • для наблюдения за эффективностью применяемой терапии;
  • для определения уровня устойчивости вируса к тому или иному препарату;
  • для подбора лекарственных препаратов.

Количественные показатели вируса в крови измеряются в МЕ на миллилитр или ДНК на миллилитр.

В случае, если доктор назначает сразу количественную диагностику, не проверив качественную, то за норму считаются показатели 75 МЕ на миллилитр. Если обнаружено меньшее количество международных единиц, результат – ВГВ не обнаружен, когда показатели превышают норму, диагностируется наличие вирусного гепатита В.

Расшифровка количественного анализа

Нормой ПРЦ при гепатите В считаются следующие показатели (в копий/миллилитр): меньше 103 – вирус неактивный; от 104 до 105 – вирус обычно неактивен; 106 – вирус активный; 107 – вирус в высокой стадии активности.

Отталкиваясь от количественных показателей можно определить со стопроцентной точностью форму заболевания (носительство, острая или хроническая), реакцию вируса на лечение, необходимость проведения дополнительных диагностик.

Хроническая форма гепатита В устанавливается в том случае, если активность вируса составляет 105 копий на миллилитр. Носительство диагностируется, если количественные показатели ниже 105 копий на миллилитр.

В период лечения необходимо регулярно (раз в три месяца) проходить повторную количественную диагностику, для того, чтобы вовремя определить момент, когда вирус выработает иммунитет к используемым препаратам и сменить методику. В случае, если все исследования проведены правильно и подобрано эффективное лечение, на повторном анализе (через трое суток лечения) будет наблюдаться снижение активности патогенных клеток как минимум на восемьдесят пять процентов.

Читайте также:  Государственная программа борьбы с гепатитом

Биопсия печени проводится в том случае, когда за шесть месяцев лечения показатели АЛТ превышают норму в два раза, а ПЦР-диагностика демонстрирует показатели ниже 105 копий на миллилитр крови.

Подготовка к проведению обследования

Для анализа необходима венозная кровь. Для того, чтобы получить максимально точные результаты, необходимо подготовиться к процедуре: отказаться от приема еды как минимум за восемь часов до забора крови; за двое суток отказаться от медикаментозного лечения (в обязательном порядке предупредить доктора о приеме препаратов); перед сдачей крови нужно провести двадцать минут в режиме отдыха; за двенадцать часов до процедуры отказаться от спортивных упражнений, спиртных напитков, курения и употребления жирной пищи.

Важно: если диагностика необходима ребенку до пятимесячного возраста, то ему нужно за шестьдесят минут до процедуры забора крови давать по столовой ложке кипяченой воды каждые десять минут.

Подводим итоги

Анализ ПЦР на гепатит В сегодня является максимально точной методикой диагностирования вируса. Метод позволяет определить мутировавшие и скрытые формы заболевания, диагностировать заболевание в первые дни инфицирования, следовательно, подобрать максимально эффективное лечение. Лаборант сравнивает полученные результаты анализа с нормой, а затем вносит их в заключение. Данные обрабатываются в течение нескольких дней. Для того, чтобы получить направление на прохождение ПЦР-анализа, необходимо обратиться к гепатологу, инфекционисту или вирусологу. Важно помнить, чем быстрее вы попадете к врачу, тем быстрее будут получены результаты, следовательно, тем эффективнее будет лечение.

Больше свежей и актуальной информации о здоровье на нашем канале в Telegram. Подписывайтесь: https://t.me/foodandhealthru

Автор статьи:

Извозчикова Нина Владиславовна

Специальность: инфекционист, гастроэнтеролог, пульмонолог.

Общий стаж: 35 лет.

Образование: 1975-1982, 1ММИ, сан-гиг, высшая квалификация, врач-инфекционист.

Ученая степень: врач высшей категории, кандидат медицинских наук.

Повышение квалификации:

  1. Инфекционные болезни.
  2. Паразитарные заболевания.
  3. Неотложные состояния.
  4. ВИЧ.

Источник

Исследования на вирус гепатита В (ИФА и ПЦР)

Антиген «s» вируса гепатита В (HBsAg)

Поверхностный антиген гепатита В в сыворотке крови в норме отсутствует.
Обнаружение поверхностного антигена (HBsAg) гепатита В в сыворотке подтверждает острое или хроническое инфицирование вирусом гепатита В.

При остром заболевании HBsAg выявляется в сыворотке крови в последние 1-2 недели инкубационного периода и первые 2-3 недели клинического периода. Циркуляция HBsAg в крови может ограничиваться несколькими днями, поэтому следует стремиться к раннему первичному обследованию больных. Метод ИФА позволяет выявить HBsAg более чем у 90% больных. Почти у 5% больных самые чувствительные методы исследования не обнаруживают HBsAg, в таких случаях этиология вирусного гепатита В подтверждается наличием анти-HBсAg JgM или ПЦР.

Концентрация HBsAg в сыворотке крови при всех формах тяжести гепатита В в разгар заболевания имеет значительный диапазон колебаний, вместе с тем имеется определенная закономерность: в остром периоде существует обратная связь между концентрацией HBsAg в сыворотке и тяжестью болезни.

Высокая концентрация HBsAg чаще наблюдается при легких и среднетяжелых формах болезни. При тяжелых и злокачественных формах концентрация HBsAg в крови чаще низкая, причем у 20% больных с тяжелой формой и у 30% со злокачественной антиген в крови может вообще не обнаруживаться. Появление на этом фоне у больных антител к HBsAg расценивается как неблагоприятный диагностический признак; он определяется при злокачественных формах гепатита В.

При остром течении гепатита В концентрация HBsAg в крови постепенно снижается вплоть до полного исчезновения этого антигена. HBsAg исчезает у большинства больных в течение 3 месяцев от начала острой инфекции.

Снижение концентрации HBsAg более чем на 50% к концу 3-й недели острого периода, как правило, свидетельствует о близком завершении инфекционного процесса. Обычно у больных с высокой концентрацией HBsAg в разгар болезни он обнаруживается в крови в течение нескольких месяцев.
У больных с низкой концентрацией HBsAg исчезает значительно раньше (иногда через несколько дней после начала заболевания). В целом срок обнаружения HBsAg колеблется от нескольких дней до 4-5 мес. Максимальный срок обнаружения HBsAg при гладком течении острого гепатита В не превышает 6 месяцев от начала заболевания.

HBsAg может быть обнаружен у практически здоровых людей, как правило, при профилактических или случайных исследованиях. В таких случаях исследуют другие маркеры вирусного гепатита В – анти HBсAg JgM, анти- HBсAg JgG, анти HBеAg и изучают функцию печени.

Читайте также:  Лисички для лечения гепатита

При отрицательных результатах необходимы повторные исследования на HBsAg.
Если повторные исследования крови в течение более 3 месяцев выявляют HBsAg, такого пациента относят к хроническим больным вирусным гепатитом В.
Наличие HBsAg – довольно распространенное явление. В мире насчитывается более 300 млн. носителей, а у нас в стране – около 10 млн. носителей.
Прекращение циркуляции HBsAg с последующей сероконверсией (образование анти-HBs) всегда свидетельствует о выздоровлении — санации организма.

Исследование крови на наличие HBsAg применяется в следующих целях:

для диагностики острого гепатита В:

  • инкубационный период;
  • острый период заболевания;
  • ранняя стадия реконвалесценции;

для диагностики хронического вирусного гепатита В;

при заболеваниях:

  • персистирующем хроническом гепатите;
  • циррозе печени;

для скрининга и выявления больных в группах риска:

  • больные с частыми гемотрансфузиями;
  • больные с хронической почечной недостаточностью;
  • больные с множественным гемодиализом;
  • больные с иммунодефицитными состояниями, в том числе СПИДом.

Оценка результатов исследования

Результаты исследования выражаются качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBsAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBsAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В, а также при хроническом вирусном гепатите В.

Антитела к ядерному антигену вируса гепатита В JgG (анти-HBcAg JgG)

В норме анти-HBcAg JgG в сыворотке отсутствует.
У больных анти-HBcAg JgG появляются в острый период вирусного гепатита В и сохраняются на протяжении всей жизни. Анти-HBcAg JgG – ведущий маркер перенесенного ВГВ.

    Исследование крови на наличие анти-HBcAg JgG применяются для диагностики:

  • хронического вирусного гепатита В при наличии HBs антигена в сыворотке крови;
  • перенесенного вирусного гепатита В.

Оценка результатов исследования

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие анти-HBcAg JgG в сыворотке крови. Положительный результат – выявление анти-HBcAg JgG свидетельствует об острой инфекции, реконвалесценции или ранее перенесенном вирусном гепатите В.

Антиген «е» вируса гепатита В (HBeAg)

В норме HBeAg в сыворотке крови отсутствует.
HBeAg можно обнаружить в сыворотке крови большинства больных острым вирусным гепатитом В. Он обычно исчезает в крови раньше HBs-антигена. Высокий уровень HBeAg в первые недели заболевания или обнаружение его на протяжении более 8 недель дает основание заподозрить хроническую инфекцию.

Этот антиген часто обнаруживается при хроническом активном гепатите вирусной этиологии. Особый интерес к определению HBeAg связан с тем, что его обнаружение характеризует активную репликативную фазу инфекционного процесса. Установлено, что высокие концентрации HBeAg соответствуют высокой ДНК-полимеразной активности и характеризуют активную репликацию вируса.

Наличие HBeAg в крови свидетельствует о высокой ее инфекциозности, т.е. присутствии в организме обследуемого активной инфекции гепатита В, и обнаруживается только в случае присутствия в крови HBs-антигена. У больных хроническим активным гепатитом противовирусные препараты применяются только при обнаружении в крови HBeAg. HBeAg – антиген – маркер острой фазы и репликации вируса гепатита В.

    Исследование крови на наличие HBe-антигена применяется для диагностики:

  • инкубационного периода вирусного гепатита В;
  • продромального периода вирусного гепатита В;
  • острого периода вирусного гепатита В;
  • хронического персистирующего вирусного гепатита В.

Оценка результатов исследования

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBeAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBeAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В или продолжающейся репликации вируса и инфекциозности больного.

Антитела к антигену «е» вируса гепатита В (anti-HBeAg)

Анти-HBeAg в сыворотке в норме отсутствует. Появление анти-НВeAg антител указывает обычно на интенсивное выведение из организма вируса гепатита В и незначительное инфицирование больного.

Эти антитела появляются в острый период и сохраняются до 5 лет после перенесенной инфекции. При хроническом персистирующем гепатите анти-НВeAg обнаруживаются в крови больного вместе с НВsAg. Сероконверсия, т.е. переход HBeAg в анти-НВeAg, при хроническом активном гепатите, чаще прогностически благоприятна, но такая же сероконверсия при выраженной цирротической трансформации печени прогноза не улучшает.

    Исследование крови на наличие анти-НВeAg применяются в следующих случаях при диагностике вирусного гепатита В:

  • установление начальной стадии заболевания;
  • острый период инфекции;
  • ранняя стадия реконвалесценции;
  • реконвалесценция;
  • поздняя стадия реконвалесценции.
  • диагностика недавно перенесенного вирусного гепатита В;
  • диагностика хронического персистирующего вирусного гепатита В.
Читайте также:  Какие первые признаки гепатита с у женщин

Оценка результатов исследования

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие антител к HBeAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление антител к HBeAg, которые могут свидетельствовать о начальной стадии острого вирусного гепатита В, остром периоде инфекции, ранней стадии реконвалесценции, реконвалесценции, перенесенном недавно вирусном гепатите В или персистирующем вирусном гепатите В.

    Критериями наличия хронического гепатита В являются:

  • бнаружение или периодическое выявления ДНК ВГВ в крови;
  • постоянное или периодическое повышение активности АЛТ/АСТ в крови;
  • морфологические признаки хронического гепатита при гистологическом исследовании биоптата печени.

Обнаружение вируса гепатита В методом ПЦР (качественно)

Вирус гепатита В в крови в норме отсутствует.
Качественное определение вируса гепатита В методом ПЦР в крови позволяет подтвердить наличие вируса в организме больного и тем самым устанавливает этиологию заболевания.

Данное исследование дает полезную информацию для диагностики острого вирусного гепатита В в инкубационном и раннем периоде развития заболевания, когда основные серологические маркеры в крови у пациента могут отсутствовать. Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Аналитическая чувствительность метода ПЦР составляет не менее 80 вирусных частиц в 5 мкл, прошедшей выявление ДНК пробы, специфичность – 98%.

Этот метод имеет важное значение для диагностики и мониторинга течения хронического ВГВ. Примерно 5-10% случаев цирроза и других хронических заболеваний печени обусловлены хроническим носительством вируса гепатита В. Маркерами активности таких заболеваний является наличие HBeAg и ДНК вируса гепатита В в крови.

Метод ПЦР позволяет определять в крови ДНК вируса гепатита В как качественно, так и количественно. Определяемым фрагментом в обоих случаях служит уникальная последовательность ДНК гена структурного белка вируса гепатита В.

    Обнаружение ДНК вируса гепатита В в биоматериале с помощью ПЦР необходимо для:

  • разрешения сомнительных результатов серологических исследований;
  • выявление острой стадии заболевания по сравнению с перенесенной инфекцией или контактом;
  • контроля эффективности противовирусного лечения.

Исчезновение ДНК вируса гепатита В из крови – признак эффективности терапии

Обнаружение вируса гепатита В методом ПЦР (количественно)

Этот метод дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к активным препаратам.
Для диагностики вирусного гепатита методом ПЦР в сыворотке крови применяются тест-системы, чувствительность которых составляет 50-100 копий в пробе, что позволяет детектировать вирус при его концентрации 5 Х 10^3 -10^4 копий/мл. ПЦР при вирусном гепатите В безусловно необходима для суждения о вирусной репликации.

Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Материалом для выявления ДНК вируса гепатита В могут служить сыворотка крови, лимфоциты, гепатобиоптаты.

  • Оценку уровня виремии осуществляют следующим образом:
  • менее 2.10^5 копий/мл (менее 2.10^5 МЕ/мл) – низкая виремия;
  • от 2.10^5 копий/мл (2.10^5 МЕ/мл) до 2.10^6 копий/мл (8.10^5 МЕ/мл) – средняя виремия;
  • более 2.10^6 копий/мл – высокая виремия.

Существует зависимость между исходом острого вирусного гепатита В и концентрацией ДНК ВГВ в крови больного. При низком уровне виремии процесс хронизации инфекции близок к нулю, при средней – хронизация процесса наблюдается у 25-30% больных, а при высоком уровне виремии острый вирусный гепатит В чаще всего переходит в хронический.

Показаниями для лечения хронического ВГВ интерфероном-альфа следует считать наличие маркеров активной репликации вируса (выявление HBsAg, HBeAg и ДНК ВГВ в сыворотке крови в течение предшествующих 6 месяцев.).

Критериями оценки эффективности лечения служат исчезновение HBeAg и ДНК ВГВ в крови, что обычно сопровождается нормализацией уровня трансаминаз и долговременной ремиссией заболевания, ДНК ВГВ исчезает из крови к 5-му месяцу лечения у 60%, к 9-му месяцу – у 80% больных. Снижение уровня виремии на 85% и более к третьему дню от начала лечения по сравнению с исходным служит быстрым и достаточно точным критерием для прогнозирования эффективности терапии.

Источник