Ошибки при обнаружении вич

Содержание статьи

Типичные ошибки при диагностике ВИЧ-инфекции.

При диагностике ВИЧ-инфекции часто встречается типичная ошибка, когда диагноз ВИЧ устанавливается на основании какого-нибудь лабораторного теста, к которому у врача по той или иной причине возникает чересчур сильное доверие.

Диагностика ВИЧ-инфекции включает в себя два этапа: установление собственно факта зараженности ВИЧ-инфекцией и определение стадии заболевания. За определением стадии неразрывно следует и выяснение характера течения заболевания, а затем и формирование прогноза у данного человека, а также выбор тактики лечения.

Как известно, диагностика любого инфекционного заболевания основана на сопоставлении эпидемиологических, клинических и лабораторных данных, и преувеличение значения одной из групп этих данных может привести к диагностическим ошибкам.

С самого начала следует предупредить читателя, что при диагностике ВИЧ-инфекции часто встречается типичная ошибка, когда диагноз устанавливается на основании какого-нибудь лабораторного теста, к которому у врача по той или иной причине возникает чересчур сильное доверие. Некоторые работники лабораторий даже сами берут на себя смелость устанавливать диагноз ВИЧ-инфекции, никогда не видя пациента.

Иногда клиницисты также безоговорочно доверяют результатам лабораторных исследований, которые могут служить только как отдельные свидетели в деле выявления ВИЧ-инфекции. За те тринадцать лет, что мы наблюдаем ВИЧ-инфекцию в России, нам пришлось видеть десятки, если не сотни, случаев ошибок, связанных с фанатичным доверием некоторых врачей к лабораторному анализу. Мы можем не останавливаться на сплошь и рядом встречающихся «обыкновенных» ошибках, которые возникают при перепутывании сывороток, неправильном заполнении документации и т. п. Клиницист просто обязан знать «диагностическую ценность» того или иного метода.

Нам известен случай, когда в Санкт-Петербурге в результате неумелого использования какого-то «нового» метода, один «ученый» выдал диагноз «ВИЧ-инфекция» совершенного здоровому и неинфицированному человеку (которого он, кстати, никогда не видел), в результате чего последний покончил с собой. Другой, не менее «выдающийся ученый», несколько лет водил за нос руководство одной бывшей советской республики, доказывая, что население этой страны «поражено эпидемией СПИДа», поскольку разработанный им «сверхчувствительный» метод исследования «выявляет ВИЧ-инфекцию у зараженных намного раньше, чем все другие известные методики». В обоих случаях речь, конечно, шла о ложных реакциях, которые давали их «новейшие методы».

Как мы уже отмечали, новые методы диагностики должны подтверждаться старыми, а не наоборот. Поэтому нашей общей рекомендацией для клиницистов и эпидемиологов является скептическое отношение ко всем «новейшим» методикам, до тех пор, пока они не «устареют», то есть пока не станут известны все их достоинства и недостатки. В текущей ситуации это прямо касается диагностики на основе полимеразной цепной реакции — ПЦР (PCR) и прочих «геннодиагностических методов», с помощью которых отдельные исследователи уже «обнаружили СПИД у египетских мумий» и «уже начали обнаруживать его у крыс». Последние достижения лишь показывает, что для полной адаптации данных методик для нужд медицины понадобится еще несколько лет.

В силу сложившейся в России традиции миллионы людей обследуются на антитела к ВИЧ без определенных показаний, и в большинстве случаев врач сначала получает данные исследования (положительная реакция на антитела к ВИЧ), а лишь потом видит самого больного и может его опросить.

При таком положении вещей быстро забывается, что лабораторное исследование служит лишь подтверждением клинического. В тех же случаях, когда врач уже знает, что у осматриваемого пациента выявлены антитела к ВИЧ, он легко может ошибиться, пойдя на поводу у бумажки с соответствующей записью.

Практический интерес представляют случаи, когда пациент находится в стадии инкубации или стадии первичных проявлений ВИЧ и количество антител в его крови еще слишком мало для выявления. Тем не менее, при достаточном опыте инфекционисты довольно быстро распознают эти случаи.

К числу наиболее изученных и распространенных относится метод обнаружения антител к ВИЧ. Так как ВИЧ-инфекция в большинстве случаев длится пожизненно, то для диагностики достаточно самого факта обнаружения антител. При ВИЧ-инфекции, в отличие от других инфекций, в большинстве случаев нет необходимости использовать парные, то есть взятые через определенный временной промежуток, сыворотки.

Обнаружение антител, в принципе, может выявить более 99% инфицированных ВИЧ лиц. Некоторые сложности связаны с тем, что антитела к ВИЧ отсутствуют в первые недели после заражения, а также их количество может заметно снижаться в терминальном периоде заболевания. Имеются сведения об отдельных, но достаточно редких случаях ВИЧ-инфекции, когда антитела длительно не обнаруживаются или исчезают на сравнительно длительный срок.

Все известные тест-системы имеют некоторые ограничения по своей возможности выявлять все сыворотки, содержащие антитела к ВИЧ, ( по чувствительности ) уже хотя бы потому, что количество этих антител может быть очень небольшим, особенно в начальный и финальный периоды болезни. Однако в модельных опытах с заранее известными заведомо позитивными сыворотками («диагностическая панель сывороток») чувствительность некоторых тест-систем может достигать 100% — то есть они выявляют все заведомо «положительные» сыворотки, использованные в данном эксперименте. При этом, разумеется, не следует забывать, что лица, проводящие испытания, могут случайно или сознательно подбирать сыворотки с теми или иными особенностями, что влияет на результат испытания.

В то же время и ложноположительные реакции присущи практически всем тест-системам. Это связано с тем, что в исследуемых материалах могут присутствовать антитела к антигенам, сходным с антигенами ВИЧ, или примесям к антигену. Так, при классической методике получения антигена ВИЧ из лизата клеточных культур вируса в конечном продукте обнаруживаются фрагменты лимфоцитов, антитела к которым могут давать ложные реакции (5) и т.п. Отмечено, что по мере повышения чувствительности теста, отмечается тенденция к увеличению числа ложноположительных реакций.

На практике к этому добавляются также ложноотрицательные и ложноположительные результаты, возникающие из-за ошибок персонала, ухудшения качества систем из-за транспортировки и хранения в неправильных условиях, из-за снижения качества тест-систем вследствие длительного хранения. Поэтому, наряду с со специфичностью и чувствительностью, определенными в лабораторных условиях иногда определяют эти параметры в «полевых» условиях, то есть такими, какими они достаются практическому здравоохранению. Как правило «полевые» характеристики, вследствие вышеперечисленных причин ниже лабораторных. На результаты использования тест-систем могут оказывать влияние даже такие факторы, как качество используемой для промывания посуды воды и т.п.

Чаще всего антитела к ВИЧ обнаруживают иммуноферментными методами. Принципиальных различий в многочисленных коммерческих тест-системах для твердофазного иммуноферментного анализа нет, хотя по чувствительности и специфичности они могут существенным образом отличаться. Довольно часто наблюдается, что одни и те же сыворотки дают различные результаты при использовании различных тест-систем. Отсюда, безусловно, признано, что «положительные» результаты обследования в одной тест-системе нельзя считать безусловно «истинно-положительным» результатом.

В связи с этим предложен и используется ряд методов для проверки специфичности результатов обнаружения антител. Среди этих методов наиболее часто применяют реакцию «иммунный блотинг» или «иммуноблот» в модификации Western Blot. (В этом красивом ученом названии «blot» переводится скорее всего как «клякса», а «western» — как «западная» отражает направление распространения этой «кляксы» по бумаге слева направо, то есть на географической карте это соответствует направлению с запада на восток.»). Суть метода «иммунный блот» заключается в том, что иммуноферментную реакцию проводят не со смесью антигенов, а с антигенами ВИЧ, предварительно распределенными методом иммунофореза по фракциям, располагающимся согласно молекулярному весу по поверхности нитроцеллюлозной мембраны. В результате основные белки ВИЧ, носители антигенных детерминант, распределяются по поверхности в виде отдельных полос, которые и проявляются при проведении иммуноферментной реакции.
Методом, теоретически упрощающим диагностику, является методика обнаружения антител к ВИЧ в слюне, которая в настоящее время приближается по чувствительности к обнаружению антител в крови, но пока значительно уступает по специфичности, то есть, дает большее количество ложноположительных результатов.

Кроме иммуноферментных, с успехом развиваются и другие методы обнаружения антител в крови: агглютинационный, иммунофлюоресцентный, радио-иммунопреципитационный и другие.

Источник

Причины ложноположительного результата на ВИЧ, как избежать ошибки

Ложноположительный анализ на ВИЧ – это ошибочный результат лабораторного исследования забранной венозной крови, при котором вирус иммунодефицита отсутствует в организме пациента, но диагностические методы дают положительный ответ.

Ни один тест или диагностическая методика не позволяют получить 100% достоверного результата. Для постановки окончательного диагноза принимаются во внимание сведения нескольких исследований (например, ИФА и иммуноблоттинга).

Допущение ошибки и постановка неверного диагноза ВИЧ может привести к необратимым последствиям. Назначаемая высокоактивная антиретровирусная терапия (ВААРТ) провоцирует серьезные побочные эффекты и способна вызвать дисфункцию некоторых внутренних органов.

Повторно пройденный тест – возможность избежать неведения и поставить точку в вопросе определения диагноза. Даже если вирус будет обнаружен, вы сможете своевременно начать лечение и прожить полноценную жизнь.

Вероятность ошибки по сообщениям специалистов составляет всего 0,01%, однако в действительности это значение гораздо выше. Предлагаем рассмотреть причины ложноположительного результата и узнать правила, позволяющие свести его получение к минимуму.

Содержание

Причины ложноположительного анализа

Ложноположительный анализ на ВИЧ довольно часто встречается среди беременных женщин (особая группа риска – женщины, рожавшие несколько раз!). Причиной является серьезный сбой гормонального фона в период беременности.

Причины ложноположительного анализа на ВИЧ:

перекрестные аллергические реакции,
недавние прививки,
воспаление мелких сосудов организма,
вирус гепатита или гриппа,
трансплантация внутренних органов,
онкологические болезни,
повышенный билирубин,
склероз (различные формы),
плохая свертываемость или повышенная густота крови,
аутоиммунные болезни печени,
туберкулез,
менструация,
любые инфекционные заболевания.

Внимание! Перед сдачей анализа на ВИЧ рекомендуется сообщить врачу о состоянии беременности, операциях и иных манипуляциях, проведенных за последние 3-4 месяца.

Получение ложноположительного результата может быть обусловлено «человеческим фактором» (например, ошибка при проведении анализа или ведении документации, перепутанные пробирки, неправильная маркировка).

Любое инфекционное или вирусное заболевание способно привести к ложноположительному результату. Сдавать анализы рекомендуется через 35-40 дней после выздоровления, чтобы быть уверенным в постановке диагноза.

Ложноположительный результат у беременных женщин

Причины ложноположительного анализа на ВИЧ у беременных женщин, за исключением гормонального сбоя, подразделяются на 2 группы:

Синтез мужских и женских генетических материалов (объединение яйцеклетки и сперматозоида) при зарождении в организме новой жизни, приводящий к образованию ДНК.

Реагируя на происходящие изменения и чужеродную ДНК, у женщины вырабатываются собственные антитела. При тестировании на ВИЧ они приведут к получению ложноположительного результата.

Стрессовое состояние, в котором пребывает беременная женщина. Вероятность возрастает при наличии психологических проблем, возникших до беременности.

Женщины сдают анализ на ВИЧ несколько раз в продолжение всей беременности. Своевременное выявление инфекции позволит предпринять ряд мер, чтобы обезопасить младенца и не допустить его инфицирования в период родов или лактации.

Об основных правилах процедуры у ВИЧ-инфицированных

Первый анализ ИФА на выявление антител проводится через 6-12 недель с момента предполагаемого заражения. В период инкубационного окна результат будет отрицательным (ложноотрицательным) либо сомнительным.

Основные правила проведения процедуры у ВИЧ-положительных:

Если человек инфицирован, то общий анализ крови ему необходимо сдавать раз в квартал. Подобная мера позволит специалисту отслеживать динамику прогрессирования заболевания, составлять и корректировать лечебный процесс;
Чтобы получить максимально корректные результаты, рекомендуется создать одинаковые условия для забора венозной крови. Для более точных исследований проводите процедуру в одной и той же специализированной лаборатории;
Сдача крови на анализы для выявления антител, выработанных по отношению к ВИЧ, рекомендована в утреннее время. Обусловлено это тем, что в утренние часы у человека повышается уровень эритроцитов.

Консультацию по вопросам проведения процедуры по забору венозной крови у пациентов, подготовке и расшифровке результатов вы можете в частной или государственной поликлинике, а также специализированном центре по борьбе со СПИДом.

Как правильно пройти тест

Портативные тесты для выявления антител к ВИЧ в домашних условиях – быстрый и простой способ узнать о наличии инфекции. Широко применяются наборы для исследования мочи, крови и слюны без обращения к специалистам.

Недостаток экспресс-тестирования состоит в высокой вероятности ошибки по сравнению с остальными диагностическими методиками. Не имея медицинского образования, люди неправильно используют или расшифровывают результаты, что приводит к получению ложноположительного диагноза.

Частота ложноположительного результата при использовании экспресс-тестирования достигает 1%. Полученного после первого исследования результата недостаточно для постановки верного и окончательного диагноза.

Как пройти тест? Исследуемую биологическую жидкость (в зависимости от выбранного набора) поместите в специальный контейнер, содержащий реагент. Подождите 15-20 минут для получения результата исследования.

Современные портативные тесты дают 3 варианта:

положительный,
отрицательный,
сомнительный.

Получение сомнительного результата обычно происходит в инкубационный период, когда размножение вируса только начинается и уровень антител сравнительно невысокий. Для постановки окончательного диагноза обратитесь в специализированную лабораторию.

Подготовка к правильной сдаче анализа

Лабораторные исследования, направленные на выявление антител к вирусу иммунодефицита человека, проводятся натощак – между последним приемом пищи и забором венозной крови должно пройти не менее 8 часов.

Подготовка к сдаче анализов на ВИЧ подразумевает:

Особый питьевой режим – разрешается употребление только простой негазированной воды. Исключите из рациона за 8 часов чай, кофе, сахаросодержащие, алкогольные и иные напитки;
Рацион питания – отказ от жареной, жирной и острой пищи за сутки до лабораторного исследования на ВИЧ;
Противопоказаны стрессовые ситуации, физическое переутомление, травмы и употребление антибиотиков.

Придерживаясь вышеперечисленных правил, удастся обеспечить максимальную точность результатов лабораторных исследований.

Диагностирование ВИЧ в лаборатории

Положительные анализы на ВИЧ, проведенные в специализированных лабораторных условиях, являются единственным основанием для постановки диагноза. Процедура проводится анонимно или открыто, по времени забор венозной крови занимает не более 20 минут.

Внимание! Сдавать анализ на ВИЧ необходимо при любом подозрении на инфицирование (например, при незащищенном половом контакте с незнакомым партнером или использовании нестерильных медицинских инструментов).

Этапы диагностирования ВИЧ:

ИФА (иммуноферментный анализ). Определяет наличие антител, вырабатываемых иммунной системой в ответ на вирус. Фактически анализ «сортирует» однозначно здоровые и подозрительные клетки. На этом этапе вероятность получения ложного результата велика.
Иммуноблоттинг. На наличие антител изучается сыворотка, получаемая при выделении плазмы и эритроцитов из венозной крови. Более эффективная диагностическая методика в сравнении с ИФА, но не безукоризненная.
ПЦР. Проверка сыворотки крови, оценка уровня CD4-лимфоцитов. Эффективный способ, используемый в частности для выявления ВИЧ у малышей с первого года жизни. Преимущество – выявление вируса на раннем периоде до образования антител.

Анализы проводятся не друг за другом, а спустя определенный промежуток времени (например, 2-3 недели с момента предыдущего исследования).

Расшифровка результатов

Результаты различных диагностических методик будут отличаться, но при выявлении трех основных наборов белков специалист ставит положительный диагноз.

Результаты забора и исследования венозной крови на ВИЧ:

*Значение*	*Краткое описание*	*Что значит?*
Не превышает 20 000 копий/мл	Недостаточный уровень РНК	У здорового человека это значение достигает 0. Для инфицированного пациента это хороший результат, показывающий невысокую вирусную нагрузку.
Варьирует от 20 000 до 100 000 копий/мл	Первичные или вторичные проявления инфекции	Около 75% ВИЧ-положительных вынуждены жить с высокой вирусной нагрузкой.
Варьирует от 100 000 до 450 000 копий/мл	Опасное значение	Чем больше значение, тем выше вероятность перехода ВИЧ в терминальную стадию (СПИД).

Окончательный диагноз сообщает врач – отрицательный или положительный. Около 95% пациентов повторно сдают анализы. Результат является положительным при условии, что из двух тестов оба показали антитела (либо из трех тестов – два).

Критерии оценки анализа

Статистика по выявлению антител после заражения:

60-65%
через 4 недели после инфицирования

80%
через 6 недель после заражения

90%
через 8 недель после инфицирования

95%
через 12 недель после заражения

Результаты оцениваются по уровню выявленных в организме антител. Они вырабатываются иммунной системой в качестве ответа на вирус. Единственный способ, основанный не на определении антител – ПЦР (полимеразная цепная реакция). Обычно она назначается для уточнения результатов, полученных посредством ИФА или иммуноблота.

Если произошла врачебная ошибка…

Получение ложноположительного результата на ВИЧ может быть обусловлено врачебной ошибкой и неаккуратностью вспомогательного персонала.

Среди них:

Нарушение порядка и требований осуществления транспортировки собранного биологического материала (венозной крови);
Использование неправильных или некачественных сывороток, представляющих основу при диагностике ИФА;
Преднамеренное или случайное нарушение правил и требований к хранению забранной венозной крови.

Внимание! К сожалению, вероятность допущения врачебной ошибки присутствует даже в лицензированных медицинских организациях.

По окончанию обследования получили положительный результат? Не паникуйте, а обязательно проведите повторное исследование на ВИЧ с применением другой диагностической методики (рекомендация профильного комитета ВОЗ).

При ложноположительном результате пересдача анализов на выявление антител к ВИЧ рекомендована по истечению 2-3 недель. Обычно пересдача посредством метода иммуноблота подтверждает отсутствие инфекции в организме человека.

Помните, что единственный способ выявления вируса иммунодефицита человека – проведение лабораторного исследования!

Источник