Пцр на гепатиты когда сдавать

Анализы до, во время и после лечения гепатита С

Диагноз гепатита С ставится на основе данных лабораторных исследований крови. От того, какие анализы на гепатит С сдаются, зависит, будет ли вовремя выявлено заболевание и назначено лечение. Эффективность лечебных мероприятий тоже оценивают по результатам анализов.

О гепатите С

Болезнь вызывает вирус гепатита С (HCV, hepatitis C virus). Этот РНК-содержащий вирус проникает в организм человека через кровь. Возможно инфицирование через вагинальную слизь, сперму, микротравмы слизистых оболочек.

Попадая в организм одним из этих путей, вирус поражает печень. Все вирусы являются внутриклеточными паразитами. И HCV — не исключение. Он размножается внутри печеночных клеток, гепатоцитов, из которых состоит печеночная ткань, паренхима.

После проникновения вируса в гепатоцит начинается многократное копирование с исходной материнской вирусной РНК новых дочерних РНК. Данный процесс называют репликацией. Затем вокруг образовавшихся РНК формируется капсула (капсид) и другие структурные элементы вирусной частицы (вириона).

Для репликации РНК и достройки вирионов требуются органические вещества. Вирус берет их у клетки. В конечном итоге гепатоцит не выдерживает такой нагрузки и погибает. Вышедшие из него вирусы проникают в новые гепатоциты.

Иммунная система, конечно, борется с HCV. И если у пациента крепкий иммунитет, вирус может быть уничтожен. Но это происходит редко. У большинства, несмотря на иммунное противоборство, вирусная активность сохраняется. Устойчивость вируса в немалой степени обусловлена его генетической изменчивостью. От набора генов, генотипа, закодированного в РНК вируса, в немалой степени зависит, как будет протекать болезнь, и насколько результативным будет лечение.

На фоне воспалительного процесса в паренхиме возрастает количество жировой ткани (стеатогепатоз). По мере гибели гепатоцитов паренхима замещается фиброзной тканью, и функции печени нарушаются. Крайняя степень фиброза, цирроз, сопровождается печеночной недостаточностью, вторичными изменениями других органов, расстройствами кровообращения и обмена веществ.

Поначалу незаметные для пациента, патологические изменения в печени формируются в течение долгих лет. Все это время вирус продолжает циркулировать в крови. Благодаря этому есть возможность сдать анализ на гепатит С.

Какие анализы нужно сдать на гепатит С

Показания к лабораторной диагностике — пищеварительные расстройства, тяжесть в правом подреберье, общая слабость, и другие признаки гепатита С. Тревогу должен вызвать тот факт, если этим симптомам предшествовали косметические и медицинские манипуляции. Болезнь не передается бытовым путем. Но если был интимный незащищенный контакт с инфицированным, анализ крови на гепатит С необходим. Лабораторная диагностика включает в себя несколько видов анализов:

Общий анализ крови

Он самый простой и наименее информативный. Неспецифические отклонения в общем анализе лишь косвенно свидетельствуют в пользу гепатита, и могут быть при других заболеваниях. Высокий уровень лейкоцитов (лейкоцитоз) вместе с ускоренным оседанием эритроцитов (СОЭ) — признак активного воспалительного процесса в печени. Повышение удельного веса лимфоцитов отмечается при вирусных инфекциях. А снижение уровня эритроцитов и гемоглобина возможно при угнетении кроветворной функции печени.

Биохимический анализ (биохимия)

Здесь важны два показателя — билирубин и трансаминазы. Билирубин — продукт естественного распада гемоглобина. В норме он обезвреживается печенью, и в составе желчи удаляется через кишечник. При поражении печени уровень билирубина повышается главным образом за счет свободной, не связанной с глукуроновой кислотой, фракции (непрямой билирубин). Хотя при хроническом течении гепатита С билирубин лишь слегка повышен или даже остается в пределах нормы.

Не менее важный показатель — трансаминазы (АСТ, АЛТ), внутриклеточные ферменты. При разрушении гепатоцитов они в большом количестве обнаруживаются в крови. Также в рамках биохимического анализа исследуют уровень и соотношение фракций белков, жиров (триглицеридов). В сравнении с общим анализом биохимия более информативна. Но по изменениям биохимических показателей нельзя судить, что у пациента именно гепатит С.

Иммуноферментный анализ (ИФА)

А вот это уже специфический анализ крови на гепатит С. В рамках этого анализа обнаруживают антитела к вирусу. А если есть антитела, значит, есть и HCV. Антитела — это белки-иммуноглобулины, которые выделяются в ответ на антигены вируса гепатита С. Взаимодействие антигенов и антител приводит к образованию иммунных комплексов.

Чтобы реакция антиген-антитело была заметной для диагностики, используют антитела, меченные ферментами. Отсюда и название анализа. Практический интерес представляют иммуноглобулины класса М и G (IgM и IgG). В острой стадии гепатита С выделяются IgM. У большинства пациентов болезнь спустя несколько месяцев переходит в хроническую форму.

Читайте также:  Как восстановить печень с гепатитом

При этом IgM исчезают, и обнаруживаются IgG. Таким образом, ИФА позволяет не только диагностировать гепатит С., но и определить стадию заболевания. Но на основе ИФА нельзя судить о тяжести гепатита. Нельзя определить и генотип вируса. Ведь сам вирус не обнаруживается, а лишь антитела к нему.

ПЦР (полимеразная цепная реакция)

Анализ ПЦР на гепатит С — самый сложный, но самый достоверный. Суть его заключается в обнаружении РНК вируса в сыворотке крови пациента. Принцип ПЦР заключается в многократном воспроизведении или амплификации участков РНК вируса. Это напоминает естественную репликацию, но только в искусственных условиях с применением дорогостоящего оборудования.

В зависимости от целей проведения разработаны три разновидности анализа.

1. Классическая ПЦР. Качественный анализ на гепатит С. Здесь определяется сам факт наличия вируса. Обнаружена РНК HCV — человек болен, не обнаружена — здоров.

2. Количественная ПЦР. Здесь измеряют вирусную нагрузку — концентрацию вирусных частиц в объеме крови. Для этого проводят ПЦР в реальном времени, и определяют количество образовавшихся РНК копий. Вирусную нагрузку определяет в МЕ (международных единицах) в 1 мл сыворотки крови:

  • Низкая: менее 3 х 104 МЕ/мл
  • Средняя: 3 х 104-8 х 105 МЕ/мл
  • Высокая: более 8 х 105 МЕ/мл.

Нормы количественных показателей ПЦР зависят от используемого оборудования, и могут различаться в разных лабораториях. Но в любом случае, чем выше уровень вирусной нагрузки, тем тяжелее протекает заболевание, и тем больше риск фатальных осложнений.

3. Генотипирование. В данном исследовании с помощью ПЦР определяется генотип и подтип или квазитип HCV. В зависимости от этого назначается схема лечения. Анализ на генотип гепатита С проводится методом секвенирования, когда определяют последовательность нуклеотидов в цепи вирусной РНК.

Где сдать анализы на гепатит С?

Общий анализ, биохимию, и ИФА делают в любом лечебном учреждении. ПЦР возможна только в крупных лечебно-диагностических центрах, где есть соответствующее оборудование. С результатами диагностики можно ознакомиться спустя 3-5 дней.

Что делать, если анализ положительный

Если выявил анализ крови гепатит С, возможно два варианта. Первый вариант — обследуемое лицо действительно инфицировано вирусом. Второй вариант — ложноположительный результат связан с диагностическими ошибками. В большей степени это характерно для ИФА. В ходе выполнения этого анализа иногда развиваются перекрестные иммунные реакции, когда иммуноглобулины реагируют на другие антигены, сходные с антигенами HCV. Среди конкретных причин:

  • аутоиммунные заболевания
  • опухолевые процессы
  • туберкулез
  • недавняя вакцинация
  • простудные заболевания
  • глистные инвазии
  • беременность.

Ошибочный результат анализа на гепатит С может быть связан с неправильной подготовкой. Кровь для исследования сдается утром натощак. Последний прием пищи допускается не позднее, чем за 12 ч. до исследования. В течение последних нескольких дней следует воздержаться от приема алкоголя, переедания с употреблением жирной, жареной пищи с острыми приправами, пряностями.

Если результат анализа на гепатит С позитивный, необходима ПЦР. Если РНК вируса при ПЦР не обнаруживается, а ИФА показывает наличие антител, то, скорее всего, ответ ИФА ложноположительный.

Исключение составляют излечившиеся от гепатита С. У них нет вируса, следовательно, ПЦР не обнаружит РНК. Но выделившиеся во время болезни JgG могут еще долго циркулировать в крови. Достоверность ПЦР максимальна, 98-99%. Но не абсолютна — в 1-2% случаев возможны ошибки. Поэтому при подозрении на ложный ответ спустя 3-4 мес. нужно повторить ИФА и ПЦР.

Что делать, если результат отрицательный

Здесь тоже возможны варианты. Первый — обследуемый всегда был здоров. Второй — у пациента был гепатит С, но он полностью излечился, снова здоров, и в лечении не нуждается. Третий — имеется ложноотрицательный результат. В данном случае ложный анализ тоже может быть обусловлен сопутствующими заболеваниями, неправильной подготовкой и техникой проведения. Но есть еще причины, связанные со сроком сдачи крови.

Для ИФА характерно т.н. диагностическое окно, когда вирус уже присутствует в организме, но антитела выработаны в малом количестве, и пока не обнаруживаются. Для ИФА продолжительность диагностического окна составляет 3-4 нед. Но в некоторых случаях этот период может длиться до 6 мес.

При подозрении на ложноотрицательный анализ нужно переходить к ПЦР. Здесь РНК выявляют спустя 10-14 дней, а в некоторых случаях через 3-4 дня после заражения. Поэтому если ИФА не показывает наличие антител, а РНК вируса при ПЦР обнаруживаются, значит, пациент инфицирован. Следует заметить, что в самом начале гепатита возможно проведение только качественной ПЦР. Количественная ПЦР и генотипирование будут информативными лишь спустя 4-6 нед. после заражения.

Читайте также:  Какое лечение при заболевание гепатит с

Какие анализы нужно сдавать во время лечения

По общему и биохимическому анализу крови можно судить о динамике воспалительного процесса, и о том, как восстанавливается печень и ее функции. Но ведущая роль принадлежит ПЦР. Количественную ПЦР проводят на 1, 2, 3, и 4 нед. лечения. По изменению вирусной нагрузки судят об эффективности лекарств и о вероятном исходе заболевания. Если вирусная нагрузка быстро снижается, это благоприятный признак, свидетельствующий о скором выздоровлении.

Какие анализы сдавать после лечения

Курс лечения гепатита С в зависимости от тяжести и вирусного генотипа длится 12 или 24 нед. После этого нужна ПЦР. Если качественный анализ ПЦР не показывает наличие РНК HCV в крови, пациент считается вылечившимся. Специфическое лечение не требуется. Нужны неспецифические мероприятия, направленные на восстановление печени.

Чем лечить?

Для того чтобы выздороветь, нужно полностью уничтожить вирус. И тогда результаты анализа ПЦР станут отрицательными. Сделать это можно только с помощью противовирусных средств последнего поколения. SoviHep D, Velakast, Ledifos — эти и другие препараты производят индийские компании по американским лицензиям. Они содержат Софосбувир с Даклатасвиром, Велпатасвиром или Ледипасвиром. Все эти препараты подавляют фазы размножения HCV внутри гепатоцитов.

Всего лишь одна таблетка в день в течение 12 или 24 нед., и выздоровление наступает в 95-99% случаев при любом генотипе вируса и форме заболевания. Стоят индийские лекарства недорого. Купить препараты может любой пациент со средним достатком.

Но аптеки не продают их. У нас вы можете приобрести индийский Софосбувир. МедФарма работает на правах официального представителя компаний из Индии. Мы поможем выбрать нужное лекарство, и доставим его по вашему адресу в течение 3-5 дней.

Did you find apk for android? You can find new Free Android Games and apps.

Источник

Анализ ПЦР на гепатит C

По оценкам, около 3% населения мира инфицировано вирусом гепатита С или гепатотропным РНК-вирусом, передаваемым через кровь. Основные способы передачи вируса включают инъекционное употребление наркотиков, небезопасные методы инъекций, переливание крови и т. д. Вирус вызывает хронический гепатит примерно у 80% инфицированных. Проведено множество исследований людей с подозрениями на гепатит. Антигены вируса гепатита С были обнаружены в цереброспинальной жидкости у 8 из 13 пациентов с ВГС. Когда медики копнули глубже, оказалось, что Вирус гепатита С может переноситься в мозг.

Вирус гепатита С — это гепатотропный вирус, который является одной из основных причин заболевания печени и потенциальной причиной значительной заболеваемости и смертности во всем мире. Вирус вызывает острый гепатит, который в основном субклинический, но постепенно развивается в хронический гепатит примерно у 80% инфицированных. Люди, инфицированные ВГС, подвержены риску развития хронического заболевания печени, цирроза и первичной гепатоцеллюлярной карциномы.

Медики рекомендует скрининг всех лиц с факторами риска инфицирования ВГС на антитела к ВГС (против ВГС) или в определенных ситуациях с помощью полимеразной цепной реакции. Если пройти своевременное обследование и сдать анализ ПЦР на гепатит С, можно узнать, есть ли заболевание.

Что представляет ПЦР на гепатит

ПЦР — это метод полимеразной цепной реакции, который проводят для обнаружения возбудителя. Диагностические тесты на гепатит С можно разделить на следующие общие категории: серологические анализы, которые обнаруживают антитела к вирусу гепатита С; молекулярные анализы, которые обнаруживают и количественно определяют или характеризуют геномы вируса у инфицированного пациента.

Серологические анализы были разделены на скрининговые тесты на анти-ВГС (иммуноферментный анализ) и дополнительные тесты, такие как анализ рекомбинантного иммуноблотинга. Были разработаны три поколения тестов ПЦР, и каждое из них привело к улучшению чувствительности обнаружения анти-ВГС.

Чаще всего проводится анализ крови. Это помогает обнаружить наличие антител в крови. Если есть хотя бы малейшее количество антител — пациент является носителем вируса гепатита, так как у здоровых неинфицированных людей этот показатель равен нулю.

Как проводится процедура

Процедура проводится путем сбора крови в лаборатории. Подготовка к анализу не сложная. Кровь следует собрать натощак с самого утра. Необходимо соблюдать все стерильные условия, так как бывают случаи, когда вирус заносят при несоблюдении санитарных условий или при повторном использовании перчаток.

Далее анализы направляются на тестирование. Спустя 1-2 суток анализ будет готов. В некоторых случаях берут дополнительный образец крови, через несколько дней, чтобы точно подтвердить наличие или отсутствие РНК.

Молекулярные вирусологические методы играют ключевую роль в диагностике и мониторинге лечения ВГС. Поскольку выращивание вируса в клетке трудно, молекулярные методы помогли выявить вирус, сделав его одним из первых патогенов, идентифицируемых чисто молекулярными методами.

Метод NAT (международный стандартный метод) считается «золотым стандартом» для обнаружения активной репликации ВГС. Он чрезвычайно эффективен для установления диагноза острой инфекции, поскольку РНК обнаруживается уже через 1 неделю после возможного инфицирования, и по меньшей мере, за 4-6 недель до сероконверсии. Диагноз инфекции устанавливается с помощью скрининга антител, за которым следует NAT для РНК ВГС для подтверждения, а также для наблюдения за пациентами во время лечения. Оценка вирусной нагрузки на исходном уровне также имеет решающее значение для определения ответа вируса во время терапии.

Читайте также:  Мед приказ по вирусному гепатиту

Когда необходимо сдать ПЦР на гепатит

ПЦР проводят при обнаружении антител к вирусу гепатита или подозрении на гепатит С. Иногда бывает и так, что человек уже является носителем гепатита или даже имеет активную форму этой болезни. Пациенты с хроническим гепатитом С, вероятно, будут иметь значительные изменения в своем физическом и психическом состоянии, чаще всего проявляющиеся как усталость и депрессия, а сам вирус гепатита С может влиять на мозговую функцию. Существует вероятность прямого инфицирования центральной нервной системы.

Есть несколько вариантов, как передается вирус, поэтому необходимо их знать. Если у пациента в жизни были подобные ситуации, стоит проверится на ВГС методом ПЦР.

Вирус передается от одного человека другому, главным образом парентеральным путем. Основными путями передачи являются:

  • потребление инъекционных наркотиков, использование нестерильных шприцев;
  • переливание крови и инъекции;
  • связанные с здравоохранением процедуры (профессиональные воздействия, такие как операции, зондирование, некоторые виды обследований);
  • татуаж;
  • распространение инфекции половым путем.

Передача профессиональным, перинатальным и половым путем менее активны по сравнению с передачей через кровь. Следовательно, эти способы не считаются основными источниками новой инфекции ВГС, независимо от населения или географического района.

Скрининг инфекции имеет несколько потенциальных преимуществ. При раннем выявлении инфекции антивирусное лечение может быть предложено в ходе заболевания, которое более эффективно на ранней, чем на поздней стадии.

Кроме того, скорейшее выявление вместе с рекомендациями и модификациями образа жизни может снизить риск передачи инфекции другим людям. Оптимальным подходом к скринингу является проверка лиц, имеющих факторы риска. Самым частым случаем, когда передается вирус, является переливание крови.

Риск инфицирования у реципиентов переливания крови слишком высок. До начала 21 века переливание крови приводило к высокому риску заражения, приблизительно 15-20%. В 20 веке 90% случаев посттрансфузионного гепатита были вызваны теми же вирусами.

Переход на взятие крови у добровольцев вместо платных доноров значительно снизил риск развития посттрансфузионного гепатита (до 10%). Скрининг крови дополнительно уменьшал возможность посттрансфузионного гепатита С, примерно в 10 000 раз — к нынешней ставке 1 на миллион переливаний. Несколько случаев, которые все еще происходят, связаны с тем, что недавно инфицированные люди сдавали кровь прежде, чем они вырабатывали антитела (период окна) к вирусу, что может занять до 6-8 недель.

Эффективность процедуры

Обнаружение вируса у пациентов во время полимеразной цепной реакции (ПЦР) свидетельствует о наличии активной инфекции и потенциально полезно для подтверждения диагноза и мониторинга антивирусного ответа на терапию.

Оптимальные анализы ПЦР в настоящее время имеют чувствительность менее 100 копий РНК ВГС на миллилитр плазмы или сыворотки. Стандартизация и проверка качества диагностических лабораторий, выполняющих ПЦР ВГС, остается важной проблемой для будущего исследования.

Существуют две основные технологии для оценки уровней РНК ВГС или вирусной нагрузки. Количественная ПЦР является наиболее чувствительным критерием для определения вирусной нагрузки на гепатит С, тогда как тест ДНК с разветвленной цепью представляется наиболее точным методом.

Основными ограничениями текущих тестов являются неадекватный динамический диапазон, высокая вариабельность анализов на основе ПЦР и низкая чувствительность теста ДНК с разветвленной цепью. Молекулярные тесты также разработаны для классификации ВГС на отдельные генотипы.

Проблема профессионального донорства крови и небезопасных методов инъекций является потенциальным источником заражения гепатитом С во всем мире. Все практикующие врачи должны понимать, как установить или исключить диагноз инфекции ВГС и правильно интерпретировать тесты.

В отсутствие профилактической или терапевтической вакцины, а также постконтактной профилактики против вируса, необходимо диагностировать инфекцию ВГС, чтобы предотвратить заражение и последующие осложнения, включая первичную гепатоцеллюлярную карциному.

Тем не менее очень многое зависит от самого пациента. Если человек замечает у себя хотя бы некоторые подозрения на инфицирование или ощущает определенные симптомы (хроническая усталость, сонливость, потеря сил) — необходимо обратиться к лечащему врачу за направлением на анализ ПЦР на гепатит С.

Источники

  1. Малыш П. Н. Полимеразная цепная реакция в диагностике гемотрансмиссивных инфекций — Луганск, Украина, 2009

Больше свежей и актуальной информации о здоровье на нашем канале в Telegram. Подписывайтесь: https://t.me/foodandhealthru

Автор статьи:

Извозчикова Нина Владиславовна

Специальность: инфекционист, гастроэнтеролог, пульмонолог.

Общий стаж: 35 лет.

Образование: 1975-1982, 1ММИ, сан-гиг, высшая квалификация, врач-инфекционист.

Источник