Пцр рнк вич качественный ультрачувствительный

ПЦР на ВИЧ, для чего нужен этот анализ

ПЦР на ВИЧ – один из самых информативных методов молекулярно-генетического диагностирования. Этот способ помогает выявить у пациента разного рода инфекционные недуги и заболевания, которые передаются по наследству. Этот же метод диагностики применим в случае проверки биоматериала на присутствие ВИЧ – тяжелого заболевания, развивающегося на протяжении всей жизни пациента. С медицинской помощью ПЦР оказалась в числе рекомендуемых анализов, проводимых на платной основе при подозрении на вирус иммунодефицита человека. Однако достоверность исследования оправдывает себя только в 80 из 100 случаев.

Содержание

Полимеразная цепная реакция

ПЦР диагностика на ВИЧ расшифровывается как полимеразная цепная реакция. Для исследования данного вида применяются различные типы биологических материалов. Среди них кровь, кроме этого может использоваться секреция из влагалища пациентки или семенная жидкость у мужчин.

Внимание! Слюна для ПЦР при диагностике ВИЧ не используется. Подобный подход признан неэффективным, поскольку в этом материале антитела к ВИЧ находятся в минимальной концентрации. Это же касается мочи, пота и слез.

Показанием к проведению описываемого исследования, является дважды положительный ИФА (иммуноферментный анализ). Об альтернативных назначениях речь пойдет позже.

Подробно о сути анализа

В основе анализа на ВИЧ методом ПЦР лежит возможность нуклеиновой кислоты самостоятельно репродуцироваться. Живые клетки состоят из белка и этих самых кислот, иначе говоря, из РНК и ДНК. Молекулы выступают в роли хранителей генетического кода.
При низкой концентрации вирусных частиц (ВИЧ) в биоматериале, проба включает не целые цепочки ДНК (дезоксирибонуклеиновой кислоты), а только их составляющие, называемые нуклеотидами. Анализ позволяет выявить даже незначительные остатки клеток вируса. Именно этим фактом объясняется способность ПЦР демонстрировать результат на ранних сроках –  спустя несколько недель после заражения ВИЧ.

Наиболее качественных результатов от проведения полимеразной цепной реакции стоит ждать при исследовании венозной крови. Пробу расщепляют с помощью оборудования. Затем фракции подвергаются ферментной обработке. Реактивные вещества, объединившись с частицами вирусной ДНК, дублируют ее. Число таких элементов возрастает по принципу цепочки, пока их наличие (не антител) в крови пациента не станет заметно лаборантам. По точно такому же принципу не работает ни один из существующих способов диагностики.

Компоненты реакции

С помощью метода ПЦР можно заблаговременно узнать о развитии вируса в организме. Почему же его нельзя назвать популярным в области бесплатной медицины и делать повсеместно? Дело в том, что такой тест на ВИЧ весьма затратный и требует наличия следующих компонентов:

  • матрица дезоксирибонуклеиновой кислоты, включающая отрезок ДНК, предназначенный для амплификации;
  • два праймера (для каждого цепного отрезка);
  • химически активный компонент полимераза для ускорения полимеризации вирусных частиц;
  • дезоксирибонуклеозидтрифосфаты;
  • частицы двухвалентного магния (заряженные);
  • специальный раствор для создания благоприятных условий, обеспечивающий должный уровень кислотности, солевой концентрации, количества частиц магния в жидкости.

Внимание! Чтобы защитить образец от перегрева, в материал добавляют небольшое количество вазелина, который содержит жиры и, соответственно, высокую температуру кипения.

Относительно высокий показатель точности анализа объясняется его повышенной чувствительностью, которая стимулирует реакцию на антитела к прочим вирусам.

Преимущества и недостатки методики ПЦР при ВИЧ

Для объективной оценки метода в таблице ниже приведем ряд преимуществ и недостатков исследования:

ПлюсыМинусы
– достаточно высокий показатель точности (выявляет вирус в 80% случаев)

– универсальность (для проведения исследования используют не только кровь, но и влагалищные выделения, сперму)

– обширный спектр методики (одну пробу биологического материала можно проверить на несколько болезней)

– скорость получения результата (пациент получает ответ на следующие сутки – более оперативны в этом плане экспресс-методы)

– высокая чувствительность (возможна диагностика на ранних этапах развития ВИЧ, чего не скажешь об ИФА или общем анализе крови на инфекцию)

–  отсутствие возрастных ограничений (такой анализ крови на ВИЧ можно брать и у ребенка с момента его рождения)

– высокая цена

– необходимость использования высокотехнологичного оборудования

– 20 % получения ложноположительных результатов (по причине высокой чувствительности метода)

Читайте также:  Турбо вич что это

Очевидно, преимуществ методики больше. Если оценивать тип диагностики с точки зрения продуктивности дальнейшего лечения и возможности продления жизни пациенту, ПЦР – самый верный путь к успеху.

Особенности анализа

Основная особенность описываемого анализа состоит в его способности к ранней диагностики ВИЧ, на что не способны другие методы исследований. Через сколько дней после предполагаемого инфицирования можно сдавать кровь на ПЦР? Обычно этот временной промежуток составляет 10-14 дней. В течение следующих 24 часов пациент получает результат. Возможные отклонения в сроках объясняются индивидуальными условиями работы диагностических центров, клиник.

Назначение исследования

ПЦР в большинстве своем проводится в целях выявления ВИЧ (синдрома иммунодефицита человека). Однако анализ можно сдать и при подозрении на развитие заболеваний, которые передаются половым путем. Этот же метод применим и в случае диагностики наследственных болезней.

ПДР-диагностика: причины для проведения

Когда следует сдавать кровь на ПЦР? Биологический материал в большинстве случаев сдается, когда вирус иммунодефицита человека приспособился к условиям организма, простимулировал выработку антител и вызвал первые симптомы ВИЧ. Однако подобное оправдано лишь в случае истечения достаточного количества времени после заражения и предполагает проведение ИФА.

Необходимость же в ПЦР возникает по инициативе пациента, который желает оперативно диагностировать заболевание (если таковое имеет место быть). Причиной тому может быть: незащищенный половой акт, контакт с биологическим материалом инфицированного, недавнее переливание крови и пр.

Кому назначается ПЦР?

Определение инфекции ВИЧ при помощи ПЦР по рекомендации специалиста производят в следующих случаях:

  • предварительное диагностирование. ПЦР безошибочно подтверждает или опровергает результат ИФА;
  • иммуноблоттинг подтвердил диагноз. Иммунный блоттинг является дополнительным способом исследования СПИДа. Оба метода применяются совместно, что позволяет исключить вероятность постановки ошибочного диагноза;
  • при подтвержденном ВИЧ-статусе с помощью ПЦР отслеживают эффект от проведения выбранного лечения;
  • для анализа крови доноров на присутствие ВИЧ-антител;
  • для определения ВИЧ-статуса у новорожденного, когда мать имеет положительный результат. ПЦР в первые дни жизни позволяет определить внутриутробное инфицирование или заражение младенца при прохождении по родовым путям. Тест проводится на 2 – 3 неделе после рождения.

Сколько времени делается анализ ПЦР, и где его можно сдать?

Анализ ПЦР на ВИЧ проводится в специальной лаборатории. Сам тест и трактовка результата не требует много времени: месяца и даже недели. Для взятия крови необходимо до 6 минут. В обычном случае специалисту, чтобы поставить диагноз и выдать заключение, потребуется не больше суток. Первые 8 часов происходит изучение крови, оставшееся время уходит на оформление. Результат можно будет забрать уже на следующий день после взятия пробы. Срок проведения экспресс-тестирования – 2 часа.

Внимание! Полис ОМС дает возможность прохождения теста бесплатно в государственном учреждении здравоохранения.

Почти любая коммерческая лаборатория способна провести исследование, причем, на анонимной основе. Человеку присваивают специальный номер, к которому затем привязывают результаты. Данная информация заливается на сайт учреждения в личный кабинет пользователя.

Сколько стоит сдать ПЦР-исследование?

Данный способ проведения исследований является достаточно дорогим. Связано это с тем, что проводить ПЦР необходимо на новейшем медицинском аппарате, манипуляция требует от специалистов достаточного багажа знаний.

Насущный вопрос: сколько же стоит человеку сдать анализ ПЦР на ВИЧ? Для этого потребуется в районе 56-60 долларов.

Проведение анализа

Проведение анализа ПЦР на ВИЧ предусматривает:

  • забор крови на проведение исследование;
  • дополнительный забор спермы у мужчины и половых выделений у женщины.

Внимание! В результате тест позволяет медикам определить высокую вирусную нагрузку для того, чтобы осуществлять контроль над состоянием больного.

Прочие особенности проведения этого анализа на ВИЧ, которые стоит принять во внимание:

  • пару дней до теста пациенту следует снизить количество жирной пищи в рационе;
  • забор крови производится на голодный желудок;
  • к расщепленным биологическим материалам в особом реакторе добавляются ферменты, синтезирующие различные инфекции;
  • анализ проводят в несколько этапов, т. к. деление молекул происходит в арифметической прогрессии. Специальная программа осуществляет сравнение большого количества клеточных структур для выявления ВИЧ.

Методы точной диагностики, к которым относится ПЦР, отличаются высокой стоимостью, но способны на ранних сроках выявить ВИЧ. В лечении подобных патологий самое главное – правильно и своевременно поставленный диагноз, который может улучшить качество жизни человека и ее продолжительность.

Источник

Пцр рнк вич качественный ультрачувствительный – ВИЧ и СПИД

ДЕШЕВЫЕ ЛЕКАРСТВА ОТ ГЕПАТИТА ССотни поставщиков везут лекарства от гепатита С из Индии в Россию, но только портал PROEKTGN поможет вам купить софосбувир и даклатасвир по самой выгодной цене и с индивидуальным подходом к каждому пациенту!

Читайте также:  Может ли вич жить в лекарстве

ПЦР на ВИЧ является достоверным и заслуживающим внимания диагностическим способом, с помощью которого определяется генетическая структура вирусного микроорганизма. Если показатель вирусного микроорганизма в крови минимален, то при проведении исследования наблюдается многократное количественное увеличение вируса. Это говорит о том, что достоверность ПЦР весьма высока.

Как сдают анализ крови на ВИЧ

Перед тем, как сдать анализ, больному на протяжении пары суток не рекомендуется питаться продуктами, богатых жирами. Исследование крови надо сдавать перед едой, последняя трапеза надо чтобы была не позже, чем 8 часов назад. Также на этот день и ранее исключаются алкогольные напитки и жареная пища.

Только такие условия обеспечат точный результат анализа.

Но с помощью общего исследования крови нельзя быть полностью уверенным в том, что в организме существует или отсутствует ВИЧ. Только некоторые параметры, после того, как больной сдал кровь, могут вызвать подозрения у доктора, что больной имеет ВИЧ:

  • Повышена скорость оседания эритроцитов.
  • Низкий гемоглобиновый показатель крови.
  • В крови понижен состав эритроцитарных клеток.
  • Уровень нейтрофильных лейкоцитов понижен.
  • Лимфоцитные клетки в крови повышены.
  • Понижены тромбоциты крови.

Что за исследование ПЦР

Как правило, делается анализ для того, чтобы определить вирус иммунодефицита в крови донора. Также производится ранняя диагностика данного вида вируса в человеческом организме до вырабатывания белковых соединений кровяной плазмы, препятствующих размножению вирусов и нейтрализующих выделяемые ими токсины (антител).

Эти специфичные белки сыворотки крови определяются стандартными исследованиями на ВИЧ (иммуноферментный анализ), но лишь через определенный период от 1 до 3 месяцев, а при редких случаях спустя год после того, как человек заразился.

Сколько дней делается анализ ПЦР РНК или ДНК на ВИЧ? Если проводить ПЦР диагностику на ВИЧ, то результат, имеющий высокую точность, будет известен спустя две недели, и он будет достоверен на 98,5-99% или спустя 5 суток. В этом случае анализ ПЦР на ВИЧ будет достоверен только на 79,5-80%. Этот анализ на ВИЧ по сравнению с иммуноферментным анализом является трудоемким исследованием, назначается не каждому человеку, а лишь тем, кому он особо показан или на платной основе.

Для чего сдается анализ

Полимеразную цепную реакцию выполняют в следующих случаях:

  • Чтобы подтвердить или опровергнуть наличие вируса иммунодефицита человека во временной промежуток с момента заражения до проявления антител (продолжается от 2 недель до 3 месяцев).
  • Если существуют сомнения в данных иммуноблоттинга.
  • При установленной совокупности всех генов ВИЧ-1 либо другой разновидности ВИЧ-2.
  • Чтобы установить и наблюдать за активностью вирусов в человеческом организме.
  • Чтобы выявить реакцию на тесты к ВИЧ у родившегося ребенка, мать которого является носителем вируса иммунодефицита человека.
  • Если переливают кровь.

В чем преимущество ПЦР

Этот способ диагностики хорош тем, что:

  • Можно выявить первопричину патологического процесса, установить правильный диагноз. Многие диагностические способы, например, ИФА, покажет распадающиеся компоненты метаболизма патогенных возбудителей. Это говорит о том, что в человеческом организме существует инфекционный процесс. При самой ДНК можно определить сегмент, являющийся инфекционным агентом, указывающий на присутствие инфекции в организме.
  • Превосходство способа в том, что в исследуемых тканевых структурах можно выявить исключительный для данного микроорганизма сегмент ДНК с характерным порядком коротких фрагментов нуклеиновой кислоты.
  • Высокая чувствительность способа позволяет обнаружить в человеческом организме клеточные и бактериальные структуры в том случае, если их количество минимально вплоть до нескольких единиц.
  • Делаются исследования быстро, поскольку не надо выделять и взращивать сам вирус. Обрабатывают биологический материал за период от 4 до 5 часов, что даст возможность выявить не только остро протекающую инфекционную патологию, но и скрытый инфекционный процесс. Высокая результативность полимеразно-цепной реакции в том случае, если исследовать вирусы, имеющие высокую антигенную изменчивостью и внутриклеточные паразиты.
  • Микроорганизмы выявляются не только из биоматериалов, взятых у больного, но и из тканевых структур, изъятых из той среды, где обитает больной.

Существует способы ПЦР для диагностики на ВИЧ: качественный и количественный методы. При качественном определяют комплиментарный сегмент ДНК в совокупности наследственного материала (генома) пораженной лимфоцитной клетки. Выявляется не сам вирусный возбудитель, а только те структуры, которые встраиваются вирусом в клетку.

Клеточное ядро будет хранить ДНК вируса, из которой будет происходить его считывание и размножение.

При количественном способе определяется количественный показатель скопированных вирусных РНК. Выполняется лишь у тех, кто инфицирован вирусом иммунодефицита человека для того, чтобы контролировать лечебный результат, определять степень тяжести патологического процесса.

Читайте также:  Как узнать вич статус самара

Насколько метод достоверен ПЦР

Увы, но данный способ не является идеальным. Связано это с тем, что данные анализа могут быть ошибочными, способны показать ложноположительный результат. К такому диагностическому способу обращаются в том случае, если надо установить диагноз или сделать скрининговые тесты на наличие ВИЧ-инфекции.

Если все выполнено верно: не были перепутаны пробирки, перед забором крови посмотрено назначение, произведена правильная маркировка пробирок медсестрой и многие другие действия, а врачом–лаборантом соблюдался лабораторный регламент (верно выполнил манипуляции с биоматериалом, исключая перекрестное загрязнение и другие нормы), использовалась отличного качества тест-система, то анализ ПЦР может давать ложный положительный результат не более, чем 2% эпизодов.

Статистика

По статистике каждый 8-ой взрослый страдает от венерических заболеваний (уреаплазмоз, сифилис, хламидиоз, трихомониаз, гонорея и другие). Казалось бы, не смертельно, но… Больным приходится не жить, а существовать. О том, как избавиться от венерических болезней и стать здоровым человеком, спросили у доктора венеролога в интервью на тему «Как спасти себя и забыть о венерологических заболеваниях». Перейти на страницу с интервью…

Source: krov.expert

Source: gepasoft.ru

Источник

ВИЧ-1, определение РНК (HIV, RNA) в плазме крови — узнать цены на анализ и сдать в Москве

Метод определения
Количественное определение, ПЦР с детекцией в режиме реального времени (real-time).

Исследуемый материал
Плазма крови (ЭДТА)

Определение РНК ВИЧ типа 1 в плазме крови методом ПЦР с детекцией в режиме реального времени. Исследование выполняется на оборудовании компании Hoffmann-La Roche (Щвейцария) по стандартизованной технологии с автоматизированной пробоподготовкой.

Исследование концентрации в крови РНК ВИЧ типа 1, которое применяют для прогноза и мониторинга эффективности терапии.

Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) является этиологическим агентом синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД). ВИЧ-инфекция может передаваться половым путем, через контаминированную кровь и ее продукты, или от инфицированной матери плоду. В период 3 – 6 недель после инфицирования обычно развивается недлительный острый синдром, для которого характерны гриппоподобные симптомы и высокие уровни виремии в периферической крови. В большинстве случаев после этого развивается ВИЧ-специфичный иммунный ответ и снижение виремии в плазме, обычно в течение 4 – 6 недель после появления симптомов. После сероконверсии (появления специфических антител) наступает клинически стабильная бессимптомная фаза, способная длиться годами. Для бессимптомного периода характерен невысокий уровень персистирующей виремии в плазме и постепенное снижение уровней CD4+ T-лимфоцитов, которое приводит впоследствии к развитию тяжелого иммунодефицита, множественным оппортунистическим инфекциям, онкогенезу и гибели. У лиц с установленной ВИЧ-1 инфекцией количественное измерение уровня РНК ВИЧ-1 в крови используют в целях прогноза и контроля антиретровирусной терапии.

Аналитические показатели:

  • Клиническая специфичность теста: 100%, при доверительном интервале 99,6-100%.

  • Чувствительность теста: от 20 копий/мл.

  • Линейный диапазон теста: 20 – 1*107 копий/мл

  • Анализируются субтипы группы M и О (ВИЧ-1).

Специальной подготовки к исследованию не требуется. С общими рекомендациями для подготовки к исследованиям можно ознакомиться 

здесь >>

Тест предназначен для использования при ведении пациентов, инфицированных ВИЧ-1, в комплексе с клиническими данными и другими лабораторными маркерами прогрессирования заболевания. Исследование применяют для прогноза (на основании исходных уровней РНК ВИЧ-1) или для мониторинга эффективности антиретровирусной терапии (на основании определения изменений уровней РНК ВИЧ-1 в плазме на протяжении курса антиретровирусной терапии). 

Внимание: тест не предназначен для скрининга на ВИЧ-1 крови и ее продуктов или для подтверждающей диагностики ВИЧ-1-инфекции.

Интерпретация результатов

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Единицы измерения: количество выявленной РНК вируса иммунодефицита человека 1 типа, выраженное в C/ml (копии/мл). Одна копия РНК ВИЧ-1 соответствует 1.67 Международных единиц (МЕ) в соответствии в первым международным стандартном ВОЗ для РНК ВИЧ-1 в тестах по выявлению нуклеиновых кислот (NIBSC 97/656).

Интерпретация результата:

  • «не обнаружено»: РНК HIV-1 не выявлена или　 значение ниже предела　чувствительности метода (20 копий/мл). Результат интерпретируют как «РНК HIV-1 не выявлена»;
  • от 20 до 10000000 C/ml (копий/мл): Полученное значение находится в пределах линейного диапазона, результат достоверен;
  • >10000000 C/ml (копий/мл): Результат интерпретируют как: «HIV-1 РНК выявлена в указанной концентрации, выходящей за верхний предел линейного диапазона; тест ставился в разведении 1:Х».

Обращаем внимание, что сроки выполнения ПЦР-исследований могут быть увеличены при проведении подтверждающих тестов.

Источник