Вирус гепатита с обнаружен референсные значения не обнаружены

Содержание статьи

Что значит референсные значения в анализах ПЦР и ИФА на гепатит С

Значения гепатита С в анализах всегда разные. Они зависят от вирусной нагрузки, генотипа HCV, наличия антител в крови и состояния иммунной системы. Существуют референсные значения, в которые должны укладываться те или иные результаты. Они подразделяются на взрослые и детские, могут различаться в зависимости от пола, возраста больного. На их основании врачи ставят диагноз и назначают лечение. Расшифровкой показателей занимается только врач.

Что такое референсные значения в анализах

Референтные значения — это границы, в которые должны уложиться результаты полученных анализов, чтобы их посчитали нормальными. Например, при диапазоне от 10 до 20, 10 — это нижняя граница, а 20 — верхняя. Если показатели исследований выше или ниже нормы, это свидетельствует о наличии той или иной проблемы со здоровьем.

Каждая лаборатория располагает собственным оборудованием, которое может отличаться от других. Поэтому референсные значения также могут быть различными. Врачи должны ориентироваться не на общие нормы, а на данные той лаборатории, где было проведено исследование.

На результаты также влияет:

режим и характер питания;
потребление алкоголя;
состояние стресса;
физическое переутомление;
время суток.

Отклонения в показателях допускаются лишь тогда, когда врач проинформирован о факторах, способных исказить общую картину показателей.

Результаты диагностики на гепатит С

Итоговые значения зависят от вида анализа на гепатит. Если есть подозрение на инфицирование, одновременно сдается кровь для анализов ИФА и ПЦР. Чтобы результат был корректным, необходимо соблюдать основные рекомендации:

Биологический материал следует сдавать только натощак в утреннее время.

Кушать можно минимум за 10 часов до процедуры.

За сутки до забора необходимо исключить жирную, сладкую еду, алкогольные напитки.

Итоги обследований на вирус HCV можно увидеть уже спустя сутки.

Что показывает ИФА

Иммуноферментный анализ выявляет наличие антител к гепатиту С в крови (анти-HCV). Они проявляются в срок от двух до шести недель после инфицирования.

Нормальное значение этого исследования — «не обнаружено». Антитела к гепатиту должны полностью отсутствовать.

Положительный результат может косвенно подтверждать диагноз. В такой ситуации назначается повторная сдача крови совместно с ПЦР.

При острой форме гепатита С в заключении указаны иммуноглобулины IgM. При хроническом течении заболевания (более полугода от заражения) в плазме обнаруживаются иммуноглобулины IgG. Также подобное значение может свидетельствовать о столкновении с болезнью в прошлом. Если одновременно выявлены два типа иммуноглобулинов, значит, идет обострение хронического гепатита.

Вот значения гепатита С на разных фазах болезни:

во время острой формы — IgM+, IgG+;
скрытая (латентная) форма — IgM-, IgG+;
хронического течение — IgM+, IgG+;
в процессе выздоровления — IgM-, IgG+, HCV-.

Анализ ИФА при гепатите С иногда бывает недостоверным. Больной может увидеть псевдоотрицательный результат в остром периоде инфекции. Иногда антитела к гепатиту С появляются на протяжении 3-5 месяцев с момента инфицирования, поэтому сразу они не определяются.

Также ложноотрицательные значения появляются у людей, которые проходят лечение сифилиса, онкологии, аутоиммунных заболеваний. В этом случае чувствительность ИФА колеблется в пределах 50-95%. У 8% ВИЧ-положительных больных диагностируется ложноотрицательный результат — их организм не производит антитела.

Значение количественной ПЦР

Полимеразная цепная реакция — это количественное исследование крови, благодаря которому определяется концентрация вируса гепатита. Это наиболее достоверный анализ, позволяющий обнаружить вирусные агенты, а не антитела.

Вирусная нагрузка при гепатите С означает то, сколько единиц вирусной РНК присутствует в 1 мл биологического материала.

Когда человек здоров, референтный результат — отрицательный (в крови нет вирусных частиц). При разной вирусной нагрузке референсные значения различны:

От 0 до 1,8×102 МЕ на 1 мл — количество вирусной РНК ниже уровня установленного значения. Это означает, что вирусные агенты присутствуют в крови, но в очень маленькой концентрации (при одновременно проведенном качественном ПЦР).
От 1,8×102 до 7,9×105 МЕ на 1 мл — вирусная активность не очень высокая.
От 8×105 до 2,3×107 МЕ на 1 мл — присутствует HCV с высокой вирусной нагрузкой.
От 2,4×107 МЕ на 1 мл и более — высокая виремия. Вероятно развитие тяжелых осложнений (цирроза, рака печени).

Количественное ПЦР-обследование назначается больным гепатитом С перед началом противовирусной терапии и в процессе нее на 3 месяце, чтобы оценить ее эффективность.

Исследование ПЦР может быть качественным, когда выявляется вирус в крови. Его необходимо проходить всем людям, у которых имеются антитела к гепатиту С. Стандартная чувствительность — 10-500 МЕ/мл. Когда показатели ниже указанных пределов, анализ недостоверный. Если благодаря качественному анализу вирус не обнаружен, человек признается здоровым.

Что делать с полученными значениями

Результаты анализов следует показать врачу. Значения количественной ПЦР диагностики позволяют определить:

Вероятность передачи вируса от инфицированного здоровому человеку. Чем выше концентрация патологических агентов в крови, тем выше риск заражения гепатитом С.
Какие препараты лучше использовать и какова эффективность противовирусной терапии.
Длительность и прогноз лечения. При высоких показателях вирусной нагрузки терапевтический курс длится дольше.

Прямой связи между количеством вирусных частиц в крови и тяжестью заболевания нет. У инфицированного при высокой вирусной нагрузке может не быть серьезного поражения клеток печени.

В некоторых случаях значения анализов показывают отрицательный ПЦР, но положительный ИФА. Это говорит о том, что в данный момент вирус HCV не обнаружен, но ранее человек перенес острую форму гепатита С.

При ложноположительных результатах больному показаны повторные анализы, а также исследование на определение генотипа, печеночные пробы и УЗИ печени.

При подтверждении гепатита С назначается лечение. Оно может быть основано на приеме интерферонов или препаратов прямого действия, которые имеют меньше побочных эффектов и большую результативность (до 99%). Это Софосбувир, Даклатасвир, Велпатасвир, Ледипасвир. С их помощью вылечить хронический гепатит даже с циррозом печени можно за полгода.

Источник

HCV, РНК количественно [реал-тайм ПЦР]

[09-012] HCV, РНК количественно [реал-тайм ПЦР]

3990 руб.

Исследование для выявления возбудителя гепатита C (HCV), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется наличие генетического материала (РНК) вируса и его количество (вирусная нагрузка) в образце крови.

РНК HCV может быть обнаружена в концентрации, находящейся за нижней границей линейного диапазона концентраций. Линейный диапазон концентраций — это диапазон, в котором можно точно посчитать количество копий возбудителя. Для данного анализа линейный диапазон концентраций РНК HCV, определяемых тест-системой: 150-1*10^8 МЕ/мл.

Синонимы русские

Вирус гепатита С (ВГС), количественное определение РНК.

Синонимы английские

Hepatitis C Virus RNA, Quantitative, Real- PCR, Blood, HCV Viral Load, Hepatitis C Virus RNA Quant.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Вирус гепатита С (HCV) — РНКсодержащий вирус из семейства Flaviviridae, который поражает печень. Он способен размножаться в клетках крови (нейтрофилах, моноцитах и макрофагах, В-лимфоцитах) и вызывать криоглобулинемию, болезнь Шегрена и В-клеточные лимфопролиферативные заболевания. HCV благодаря высокой мутационной активности способен избегать воздействия защитных механизмов иммунной системы. Существует 6 генотипов и множество субтипов вируса, которые имеют разные значения для прогноза развития заболевания и эффективности противовирусной терапии.

Основной путь передачи инфекции — через кровь (препараты для переливания элементов крови и плазмы, донорские органы, нестерильные шприцы, иглы, инструменты для татуирования, пирсинга). Вероятно заражение при половом контакте и ребенка от матери во время родов, но это случается нечасто.

Острый вирусный гепатит, как правило, характеризуется бессимптомным течением и остается невыявленным в большинстве случаев. Только у 15 % инфицированных заболевание протекает остро — с тошнотой, ломотой в теле, отсутствием аппетита и потерей веса (редко сопровождается желтухой). У 60-85 % инфицированных развивается хроническая инфекция, что в 15 раз превышает частоту хронизации при гепатите В. Хронический вирусный гепатит С протекает с повышением печеночных ферментов и скудным проявлением симптомов. У 20-30 % больных заболевание приводит к циррозу печени, увеличивая риск развития печеночной недостаточности и гепатоцеллюлярной карциномы.

Выявление РНК HCV свидетельствует о размножении вируса в организме и является методом диагностики заболевания. Генетический материал вируса можно обнаружить с помощью ПЦР через 10-12 дней после инфицирования — в этот период специфические антитела, которые образуются через несколько месяцев после заражения, отсутствуют и биохимические показатели функции печени находятся в пределах референсных значений.

Посредством ПЦР выявляют РНК вируса качественно или количественно. Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита С и его активное размножение. Количественное определение вирусной нагрузки с учетом генотипа HCV позволяет контролировать проводимую терапию и прогнозировать течение болезни.

Эффективность лечения оценивается по количеству РНК до и во время терапии. Обычно вирусная нагрузка крови снижается в несколько раз за первые три месяца успешного лечения. При эффективной терапии виремия уменьшается на два порядка в первые 4-12 недель лечения и после окончания курса терапии генетический материал вируса в крови не обнаруживается. Отсутствие снижения виремии через 12 недель с начала лечения указывает на его неэффективность. Рекомендовано проводить анализ до начала терапии, на 4-й, 12-й и 24-й неделях лечения и через 24 недели после окончания курса. Длительность терапии и периодичность количественного определения РНК вируса гепатита С зависит от генотипа вируса и степени повреждения печени.

Для чего используется исследование?

Для подтверждения диагноза «вирусный гепатит С».
Для прогнозирования течения вирусного гепатита С.
Для мониторинга противовирусной терапии и решения вопроса о дальнейшей тактике лечения.

Когда назначается исследование?

При качественном обнаружении РНК вируса гепатита С.
При остром и хроническом вирусном гепатите С.
При микст-гепатитах.
При планировании, во время и после окончания противовирусной терапии.

Что означают результаты?

Референсные значения: не обнаружено.

Не обнаружено — РНК вируса гепатита С не обнаружена или значение ниже предела чувствительности метода (50 МЕ/мл).
От 150 до 3*10^4 МЕ/мл — РНК вируса гепатита С обнаружена, низкая виремия.
От 3*10^4 до 8*10^5 МЕ/мл — РНК вируса гепатита С обнаружена, средняя виремия.
Свыше 8*10^5 МЕ/мл — РНК вируса гепатита С обнаружена, высокая виремия.
> 1*10^8 МЕ/мл — РНК вируса гепатита С обнаружена в концентрации выше линейного диапазона концентраций.

Линейный диапазон концентраций РНК вируса гепатита С, определяемых тест-системой, составляет 150-1*10^8 МЕ/мл.

Важные замечания

Уровень вирусной нагрузки крови не указывает на степень повреждения печени и тяжесть заболевания. Для их оценки необходимо исследовать биохимические показатели и материалы биопсии.
При планировании лечения очень важно определить генотип вируса гепатита С.

Также рекомендуется

Anti-HCV, антитела, ИФА
Аnti-HCV, антитела
Антитела к структурным и неструктурным белкам вируса гепатита
HCV, РНК [реал-тайм ПЦР]
HCV, генотипирование (типы 1a, 1b, 2, 3a, 4), РНК [реал-тайм ПЦР]
Гамма-глютамилтранспептидаза (гамма-ГТ)
Аланинаминотрансфераза (АЛТ)
Аспартатаминотрансфераза (АСТ)
Фосфатаза щелочная общая
Альбумин в сыворотке
Билирубин общий
Холестерол общий
Тромбиновое время
Фибриноген
Общий анализ крови (без лейкоцитарной формулы и СОЭ)
Лейкоцитарная формула
Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)

Кто назначает исследование?

Инфекционист, гепатолог.

Литература

Возианова Ж.И. Инфекционные и паразитарные болезни: В 3х т. — К.: Здоровье, 2000. — Т.1.: 600-690.
Кишкун А.А. Иммунологические и серологические исследования в клинической практике. — М.:ООО МИА, 2006. — 471-476 с.
Harrison’s Principles of Internal Medicine. 16th ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.

Lerat H, Rumin S, Habersetzer F, and others. In vivo tropism of hepatitis C virus genomic sequences in hematopoietic cells: influence of viral load, viral genotype, and cell phenotype. Blood. 1998 May 15;91(10):3841-9.PMID:9573022.
Revie D, Salahuddin SZ. Human cell types important for hepatitis C virus replication in vivo and in vitro: old assertions and current evidence. Virol J. 2011 Jul 11;8:346. doi: 10.1186/1743-422X-8-346. PMID:21745397.

Источник

РНК вируса гепатита С

«Выявление генов вируса гепатита С (HVC) в крови пациента является вторым этапом лабораторной диагностики этой инфекционной патологии. Чтобы обнаружить возбудителя, который не имеет клеточной мембраны и, соответственно, поверхностных антигенов, используют метод полимеразной цепной реакции. С помощью этого метода определяют непосредственно молекулу, в которой закодирована вся его генетическая информация — РНК.

Содержание

Что это значит?

Анализ на РНК вируса гепатита С

РНК вируса гепатита С: метод ПЦР

РНК гепатита С: качественный анализ

РНК гепатита С: количественный анализ

Гепатит С: анализы и расшифровка

РНК — Рибонуклеиновая кислота, наряду с ДНК входит в состав клеток всех живых организмов. Вирус гепатита С содержит молекулу РНК и имеет способность к ее мутациям.

Исследование на наличие генома HVC назначают обычно после того, как проводят общий, биохимический анализ крови и получают положительный ответ на антитела (anti-HVC).

Что это значит?

Исследование на антитела к HVC является скрининговым, то есть с его помощью можно обследовать большие контингенты населения (медиков, беременных, пациентов стационаров, доноров, инъекционных наркоманов, ВИЧ-инфицированных). Отрицательный результат лабораторного анализа anti-HVC говорит о том, что в крови обследуемого не обнаружено иммунной реакции на вирус. Отрицательный результат может быть получен в таких случаях:

Если человек никогда не заражался гепатитом С.

Если чувствительность лабораторной тест-системы оказалась ниже, чем концентрация anti-HVC.

Если инфицирование произошло менее 2 месяцев назад и anti-HVC в крови еще недостаточно для определения. При ложноотрицательном ответе по причине человеческого фактора.

Если же получен результат, что антитела к HVC у больного обнаружены, это значит, что вирус гепатита С находился в организме обследуемого на момент проведения исследования или был в крови некоторое время назад. При положительном результате на anti-HVC возникает необходимость проведения дополнительных лабораторных исследований, которые обнаружат генетический материал самого возбудителя, определят концентрацию его генов (вирусную нагрузку, виремию) и установят генотип.

Анализ на РНК вируса гепатита С

Геном HVC в лабораторных условиях можно обнаружить с помощью нескольких исследований:

разветвленной ДНК (р-ДНК);
транскрипционной амплификации (ТМА);
полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Метод р-ДНК — недорогой и простой способ обнаружения вирусного генома у большого количества обследуемых людей. Его главным недостатком является низкая чувствительность: выявляет HVC только при его концентрации свыше 500 МЕ/мл.

Метод транскрипционной амплификации обнаруживает в сыворотке крови нуклеиновые кислоты вируса. Анализ имеет высокую чувствительность (5-10 МЕ/мл), но он еще недостаточно внедрен в повсеместную лабораторную практику.

Метод ПЦР в России является самым распространенным и доступным лабораторным обследованием с высокой чувствительностью (от 50-60 МЕ/мл).

Исследование ПЦР выполняется в любой клинической лаборатории, имеющей соответствующую аккредитацию. Очень важным нюансом этого метода диагностики, который влияет на результат анализа, является чувствительность используемой в лаборатории тест-системы. Например, чувствительность диагностикума 60 МЕ/мл, как в лабораториях «Инвитро», позволяет обнаруживать вирусную РНК спустя 3 месяца после заражения. При низкой чувствительности тест-системы гены возбудителя могут не обнаруживаться даже спустя 4 месяца после инфицирования.

РНК вируса гепатита С: метод ПЦР

Метод ПЦР имеет множество преимуществ перед другими лабораторными исследованиями для обнаружения генов HVC:

высокая чувствительность. Метод позволяет определять генетический материал возбудителя даже при его минимальной концентрации в образце;
большая специфичность. Выявляет гены вируса определенного генотипа среди множества ДНК и РНК других возбудителей, что позволяет проводить генотипирование возбудителя;
быстрота проведения. Отсутствие длительного процесса культивирования возбудителя сокращает время получения результата до нескольких часов; универсальность анализа.

Универсальная процедура проведения исследования позволяет одновременно использовать один образец крови человека для обнаружения генетического материала разных возбудителей. Эти преимущества позволяют считать ПЦР «золотым стандартом» лабораторной диагностики вирусного гепатита С вместе с иммуноферментным анализом на anti-HVC.

ПЦР — это исследование, используемое для определения генов HVC в крови обследуемого человека. Исследование состоит из нескольких этапов:

Отбора образца биоматериала.
Многократного увеличения концентрации копий РНК в отобранном образце.
Обнаружения генетического материала с помощью специальных тест-систем.

После забора венозной крови у пациента проводят искусственное инициирование процесса множественного реплицирования (амплификации, копирования) генов HVC.

Для этого определенным способом несколько раз изменяют температуру внутри пробирки с биоматериалом. Когда количество копий РНК в пробирке достигает необходимого значения, проводят обнаружение возбудителя с помощью специальных тест-диагностикумов.

ПЦР-диагностика бывает

качественной (обнаруживает присутствие вируса),
количественной (определяет концентрацию вирусных генов в единице объема)
генотипической (устанавливает генотип возбудителя).

РНК гепатита С: качественный анализ

Задача качественного ПЦР — определение наличия HVC в представленном биоматериале. Это исследование проводится обычно для скрининговой диагностики заболевания или выявления носительства. Назначают его после того, как выявят anti-HVC методом ИФА.

Чтобы поставить диагноз гепатита С, достаточно обнаружить генетический материал HCV качественно, то есть без подсчета его концентрации в объеме крови. Результатом качественного ПЦР может быть: «РНК обнаружено» или «РНК не обнаружено».

syringe needle with droplet of blood in front of a finger and on blue bacjground

Точность метода соответствует 95%. При этом точность самих тест-диагностикумов достигает 100%, а 5% — это человеческий фактор, который всегда присутствует в лабораторных исследованиях. Чтобы избежать ложноотрицательного анализа, особенно у людей с низкой виремией, необходима высокая чувствительность применяемой в исследовании диагностической системы. Чувствительность тест-системы должна быть не меньшей, чем 60 МЕ/мл.

РНК гепатита С: количественный анализ

Количественный анализ назначают тогда, когда нужно знать уровень виремии в организме человека. Показаниями для проведения этого исследования являются:

положительный результат качественного ПЦР при условии обнаружения антител к вирусу;
установление стадии патологии;
определение вирусной нагрузки при гепатитах;
выбор комбинации противовирусных препаратов;
мониторинг вирулогического ответа на проводимую противовирусную терапию;
оценка вероятности перехода острого гепатита С в хронический.

Результат анализа выражается в МЕ/мл (международных единицах в 1 мл сыворотки) или в копиях/мл (количестве копий генов вируса в 1 мл сыворотки). Количественный ПЦР не имеет нормы: в норме ген HVC в крови человека обнаруживаться не должен. Полученные результаты обследования сравнивают с референсными значениями, установленными для той или иной степени вирусной нагрузки.

Так, показатели (в МЕ/мл):

ниже 4×10*5 считаются низкой виремией;
от 4×10*5 до 8×10*5 — средней;
свыше 8×10*5 — высокой.

Чем больше копий вирусной РНК в крови, тем агрессивнее протекает заболевание и больше риск передачи вируса окружающим. Но уровень вирусной нагрузки — не единственный показатель, влияющий на тяжесть течения патологии и дальнейший прогноз для пациента: важен также генотип возбудителя.

Установление генотипа необходимо для назначения правильной схемы лечения. От него также зависит прогноз для здоровья и жизни пациента. Например, вирус 3 генотипа чаще приводит к фиброзу или циррозу печени, в сравнении с пациентами носителями 1 генотипа.

Гепатит С: анализы и расшифровка

РНК Диагноз гепатита С невозможно поставить только по результатам только качественного и/или количественного анализа ПЦР: определения HVC и уровня вирусной нагрузки недостаточно для назначения адекватной противовирусной терапии. Потенциального больного нужно обследовать комплексно (клинически, лабораторно, инструментально), чтобы иметь объективную картину патологии. Правильно назначить комплекс обследований для установления диагноза гепатита С, а затем грамотно расшифровать полученные результаты может только врач.

Источник